การดัดแปลงเชื้อ Lactobacillus rhamnosus NH37 เพื่อพัฒนาเป็นวัคซีนสำหรับป้องกันเอนเตอโรไวรัสสายพันธุ์ 71

บทคัดย่อ

งานวิจัยนี้มีวัตถุประสงค์เพื่อสร้างเชื้อ Lactobacillus rhamnosus NH37 สายพันธุ์ผสมที่มีการสร้างโปรตีน viral protein 1 (VP1) ของไวรัสเอนเตอโรที่ผนังเซลล์ และศึกษาประสิทธิภาพการกระตุ้นให้หนูสร้างแอนติบอดีชนิด secretory immunoglobulin A (sIgA) ในบริเวณลำไส้ การสร้าง gene cassette Ldh:SS:VP1:CWA:TT ขนาด 2,101 bp สำหรับควบคุมการสร้างโปรตีน VP1 ในเชื้อ L. rhamnosus NH37 ประกอบด้วย Ldh gene-derived constitutive promoter, Cwh signal peptide, codon-optimized VP1 และ CWA domain ที่เรียงต่อกัน ยีน VP1 ขนาด 891 คู่เบส ได้ปรับโคดอนให้กลายเป็น highly codon usage ในเชื้อ L. rhamnosus NH37 นอกจากนี้ ได้เติมตำแหน่งเอนไซม์ตัดจำเพาะ NotI และ NdeI ไว้ทางปลาย 5’-end และทางปลาย 3’-end ตามลำดับ เพื่อสะดวกในการโคลน ผลการโคลนยีน Ldh:SS:VP1:CWA:TT เข้าสู่เวกเตอร์ของเชื้อแลคโตบาซิลลัสพบว่าไม่สามารถดำเนินการได้สำเร็จ จึงเป็นเหตุทำให้ไม่สามารถสร้างเชื้อ L. rhamnosus NH37 ที่สร้างโปรตีน viral protein 1 ของไวรัสเอนเตอโรที่ผนังเซลล์ได้ ทำให้ไม่สามารถดำเนินงานวิจัยได้ตามวัตถุประสงค์ที่ตั้งเป้าหมายไว้ อย่างไรก็ตาม งานวิจัยครั้งนี้ได้ดำเนินการสร้าง gene cassette Ldh:SS:VP1:CWA:TT ซึ่งสามารถนำไปใช้ในการวิจัยในอนาคตต่อไปได้ คำสำคัญ Probiotic, Lactobacillus rhamnosus, enterovirus71, viral protein 1, hand foot and mouth disease

คำสำคัญ