การพัฒนาเอ็นไซม์จากเฟจเพื่อจัดการปัญหาการติดเชื้ออซีเนโตแบคเตอร์ บอมานนิไอในประชากรสูงอายุในประเทศไทย

บทคัดย่อ

เอนไซม์จากแบคเทอริโอเฟจถูกนำมาศึกษาเพื่อใช้เป็นสารต้านจุลชีพ ในงานวิจัยนี้ได้ศึกษานี้เอ็นไซม์ cell wall hydrolase (หรือ endolysin) จากเฟจ vB_AbaM_PhT2 (vPhT2) เอนโดลิซินนี้มีบริเวณอนุรักษ์เป็น lysozyme like domain และมีความสัมพันธ์อย่างใกล้ชิดทางสายวิวัฒนาการกับเอนโดลิซินจากเฟจ RL_2015 และ AM24 เมื่อผลิตรีคอมบิแนนท์โปรตีนของเฟจเอนไซม์เอนโดไลซิน (lysAB-VT2) และ endolysinที่เชื่อมกับ hydrophobic amino acid (lysAB-VT2 -fusion) พบว่าเอ็นไซม์ทั้งสองสามารถย่อย autoclaved cell ของแบคทีเรียแกรมลบได้หลายชนิด ความเข้มข้นต่ำสุดในการยับยั้ง (MIC) A. baumannii ของ lysAB-vT2 สูงกว่า 10 mg/mL ส่วน MIC ของ lysAB-VT2 -fusion เท่ากับ 2 mg/mL lysAB- vT2-fusion พบมีการเสริมฤทธิ์กับ colistin และ polymyxin B และ CuCl2 ไม่พบมีผลในการเสริมฤทธิ์กันกับน้ำยาฆ่าเชื้อ Dettol, Clorox และ Heiter รวมทั้งแบคเทอริโอเฟจ checkerboard assay ระหว่าง lysAB- vT2-fusion กับ colistin พบว่ามีค่า FIC index เท่ากับ 0.25488 การศึกษาฤทธิ์ของ lysAB-VT2 -fusion กับยา colistin กับเชื้อ A. baumannii สายพันธ์ต่างๆ จำนวน 23 สายพันธ์ รวมทั้งเชื้อ E. coli ATCC 25922, P. aeruginosa ATCC 27853, K. pneumoniae ATCC 27736พบว่าการใช้ lysAB-VT2 -fusion กับยา colistinสามารถทำลายเชื้อได้ดีเพิ่มขึ้นเทียบกับการใช้เอ็นไซม์อย่างเดียว lysAB-VT2 -fusion ความเข้มข้น 4mg/ml มีความสามารถในการทำลาย Biofilm ของ A. baumanni ที่อายุ 72 ชั่วโมงเช่นเดียวกับเฟจ vPhT2 ปริมาณ1x 108 PFU/ml เมื่อบ่มเอ็นไซม์ lysAB- vT2-fusion กับ T24 human cells ที่ infected ด้วย A. baumannii พบว่า เอ็นไซม์ที่ความเข้มข้น 2mg/ml สามารถช่วยลดความเป็นพิษของเซลล์เมื่อติดเชื้อ A. baumanni โดยสรุป การศึกษานี้แสดงถึงความสามารถของ lysAB- vT2-fusion สายพันธุ์ต่างๆ ของ A. baumannii และปฏิกิริยาเสริมฤทธิ์กันของเอนโดไลซินกับสารชนิดต่างๆซึ่งจะเป็นประโยชน์ในการนำเอ็นไซม์ไปใช้ประโยชน์นำไปพัฒนาเป็นผลิตภัณฑ์การทำลายเชื้อ A. baumannii

คำสำคัญ