การผลิตและศึกษาคุณสมบัติในการทำลายแบคทีเรียของโปรตีนรีคอมบิแนนท์เอ็นโดไลซินของอซีเนโตแบคเตอร์ บอมมานิไอ แบคเทอริโอเฟจ

บทคัดย่อ

บทคัดย่อ Multidrug-resistant A. baumannii (MDR-AB) เป็นแบคทีเรียที่มีความสำคัญทางการแพทย์ เนื่องจากเป็นเชื้อก่อโรคในโรงพยาบาล และยังพบอุบัติการณ์การดื้อยาของเชื้อที่มีแนวโน้มสูงขึ้น จึงจำเป็นต้องมีการศึกษาวิธีการที่สามารถใช้ควบคุมและรักษาการติดเชื้อ MDR-AB ซึ่งการประยุกต์ใช้แบคเทอริโอเฟจในรูปแบบเฟจบำบัดเป็นอีกหนึ่งวิธีการที่มีประสิทธิภาพ ทั้งการนำอนุภาคและ lytic enzyme ของแบคเทอริโอเฟจมาใช้ มีการศึกษาก่อนหน้านี้ที่ทำการแยกแบคเทอริโอเฟจที่จำเพาะต่อเชื้อ A. baumannii สายพันธุ์ ?ABP-01 จากบ่อบำบัดน้ำเสีย การศึกษาครั้งนี้จึงมีวัตถุประสงค์ เพื่อศึกษาคุณสมบัติทางอณูชีววิทยาของแบคเทอริโอเฟจ ?ABP-01 รวมถึงการตรวจสอบหายีนเอนโดไลซินและผลิตรีคอมบิแนนท์โปรตีนเอนโดไลซิน เมื่อตรวจสอบยีนเอนโดไลซิน ด้วยเทคนิค PCR สามารถตรวจพบยีนเอนโดไลซินในจีโนมของ ?ABP-01 (lysABP-01) จากนั้นนำไปโคลนและหาลำดับเบสเพื่อนำมาวิเคราะห์ ผลจากการวิเคราะห์ลำดับเบสพบว่า มีบริเวณ open reading frame (ORF) เท่ากับ 558 bp แปลรหัสให้โปรตีนซึ่งมีมวลโมเลกุลจากการทำนาย 21.14 kDa (กรดอะมิโน 185 ตัว) และมีค่า pI เท่ากับ 9.42 ผลจากการวิเคราะห์ลำดับกรดอะมิโนพบบริเวณอนุรักษ์คือ lysozyme like domain เพื่อศึกษาหน้าที่ของเอนโดไลซิน ทำการผลิตรีคอมบิแนนท์โปรตีนเอนโดไลซิน (LysABP-01) และนำมาศึกษาคุณสมบัติ enzyme activity ผลจากการศึกษาด้วยเทคนิค plate lysis assay พบว่าโปรตีน LysABP-01 สามารถย่อย autoclaved cell (crude cell wall) ที่เตรียมจากเซลล์แบคทีเรีย A. baumannii สายพันธุ์มาตรฐาน ATCC 19606 สายพันธุ์ AB 1589 ที่ดื้อยาหลายชนิด รวมทั้งเชื้อ Escherichia coli และ Pseudomonas aeruginosa แต่ไม่ย่อย Staphylococcus aureus ผลจากการศึกษาครั้งนี้สามารถใช้เป็นข้อมูลเบื้องต้น ในการนำ LysABP-01 ไปพัฒนาเป็น therapeutic agent เพื่อใช้ควบคุมการติดเชื้อ MDR-AB

คำสำคัญ