การพัฒนาชุดทดสอบยาปฎิชีวนะเพนนิซิลีนจีที่ตกค้างในน้ำนม

บทคัดย่อ

วัตถุประสงค์ของงานวิจัยนี้เพื่อพัฒนาชุดทดสอบยาปฎิชีวนะเพนนิซิลีนจีที่ตกค้างในน้ำนม โดยใช้เทคนิคเอนไซม์ อิมมูโนเอสเสย์ อาศัยหลักการจับกันระหว่างแอนติบอดีของเพนนิซิลีนจีกับแอนติเจนเพนนิซิลีนจี ตรวจวัดความเข้มข้นของเพนนิซิลีนจีโดยติดตามการเกิดปฏิกิริยาของเอนไซม์เปอร์ออกซิเดสที่ติดฉลากอยู่กับแอนติบอดี ผลจาการเกิดปฏิกิริยาทำให้ได้สารละลายสีเหลือง และตรวจวัดความเข้มของสีได้ที่ความยาวคลื่น 450 nm ศึกษาหาปัจจัยต่างๆ ที่มีผลต่อประสิทธิภาพของชุดทดสอบ ผลการทดลองพบว่าสภาวะที่เหมาะสมสำหรับการตรึงแอนติบอดีไว้ในไมโครเพลทคือใช้แอนติบอดีเข้มข้น 0.25 mg/mL ละลายในสารละลายคาร์บอเนตบัฟเฟอร์ ความเข้มข้น 0.1 M พีเอช 9.60 ใช้เวลาในการตรึง 12 ชั่วโมง ต่อไปศึกษาหาสภาวะที่เหมาะสมของการติดฉลากแอนติบอดีตัวที่สองด้วยเอนไซม์ พบว่าความเข้มข้นของแอนติบอดีและไบโอตินที่เหมาะสมคือ 0.4 mg/mL และ 1 mg/mL ตามลำดับ ใช้เวลาในการเกิดปฏิกิริยา 40 นาที ในสารละลายฟอสเฟตบัฟเฟอร์ พีเอช 7.50 ความเข้มข้น 0.1 M เวลาที่ใช้ในการวิเคราะห์สำหรับชุดทดสอบนี้คือ 60 นาที ภายใต้สภาวะที่เหมาะพบว่าชุดทดสอบที่พัฒนาขึ้นมามีประสิทธิภาพในการตรวจวัดเพนนิซิลีนจี ขั้นต่อไปได้สร้างเครื่องโฟโตมิเตอร์ โดยใช้แหล่งกำเนิดแสงที่ความยาวคลื่น 450 nm สุดท้ายทดสอบการทำงานของเครื่องโฟโตมิเตอร์ พบว่าเครื่องโฟโตมิเตอร์ให้ค่าการดูดกลืนแสงที่วัดสัมพันธ์กับความเข้มข้นของเพนนิซิลีนจี

คำสำคัญ