กำลังโหลดข้อมูล…
Search for a command to run...
เริ่มจากการออกแบบไพรเมอร์โดยใช้ลำดับเบสของ TK โดเมน (คู่เบสที่ 2,368 – 3,204) ของerbB2 จากฐานข้อมูล GenBank โดยเติมตำแหน่งสำหรับตัดด้วยเอนไซม์ตัดจำเพาะ (BHssII/XhoI) และ His-Tag ตรงปลาย C-terminal จากนั้นจึงใช้ชุดสกัดสำเร็จรูปสำหรับการทำให้ผลิตภัณฑ์พีซีอาร์ที่ได้บริสุทธิ์ แล้วทำการตัดผลิตภัณฑ์พีซีอาร์ที่ได้ด้วยเอนไซม์ตัดจำเพาะ (BHssII/XhoI) เพื่อสร้างดีเอ็นเอปลายเหนียว ก่อนนำดีเอ็นเอที่ได้ไปเชื่อมต่อกับพลาสมิด pFastBac-1 จากนั้นทำการย้ายพลาสมิดเข้าสู่เซลล์เจ้าบ้าน E. coli DH10Bac เพื่อแทรกชิ้นยีน TK เข้ากับยีนของ Baculovirusเริ่มจากการออกแบบไพรเมอร์โดยใช้ลำดับเบสของ TK โดเมน (คู่เบสที่ 2,368 – 3,204) ของerbB2 จากฐานข้อมูล GenBank โดยเติมตำแหน่งสำหรับตัดด้วยเอนไซม์ตัดจำเพาะ (BHssII/XhoI) และ His-Tag ตรงปลาย C-terminal จากนั้นจึงใช้ชุดสกัดสำเร็จรูปสำหรับการทำให้ผลิตภัณฑ์พีซีอาร์ที่ได้บริสุทธิ์ แล้วทำการตัดผลิตภัณฑ์พีซีอาร์ที่ได้ด้วยเอนไซม์ตัดจำเพาะ (BHssII/XhoI) เพื่อสร้างดีเอ็นเอปลายเหนียว ก่อนนำดีเอ็นเอที่ได้ไปเชื่อมต่อกับพลาสมิด pFastBac-1 จากนั้นทำการย้ายพลาสมิดเข้าสู่เซลล์เจ้าบ้าน E. coli DH10Bac เพื่อแทรกชิ้นยีน TK เข้ากับยีนของ Baculovirus