การพัฒนาชุดทดสอบสำเร็จรูปอีไลซ่าสำหรับชันสูตรโรคเมลิออยโดซิสในปศุสัตว์ทางซีรัมวิทยา

บทคัดย่อ

ที่มาของการศึกษา: ปัจจุบันการการชันสูตรโรคเมลิออยด์ในห้องปฏิบัติการของกรมปศุสัตว์โดยวิธีทางซีรัมวิทยาใช้วิธี indirect hemaemagglutination (IHA) ซี่งมีขั้นตอนที่ซับซ้อนยุ่งยาก การอ่านผลค่อนข้างยากต้องใช้ผู้มีประสบการณ์และความชำนาญสูง อีกทั้งหลีกเลี่ยงการใช้สัตว์ทดลองเนื่องจากต้องใช้เลือดแกะในกระบวนการทดสอบโรค ดังนั้นการพัฒนาชุดทดสอบสำเร็จรูปอีไลซ่า จึงเป็นอีกวิธีหนึ่งที่สามารถชันสูตรโรคเมลิออยด์ หรือใช้ทดแทนวิธี IHA ได้ เนื่องจาก ELISA เป็นวิธีที่ใช้ในการตรวจหาแอนติบอดีต่อเชื้อ Burkholderia pseudomallei ที่อ่านผลได้ชัดเจน และมีความความไวและความจำเพาะสูงกว่าหรือเท่ากับวิธี IHA วิธีการ: เตรียมแอนติเจนจากเชื้อ B. pseudomallei ที่เพาะแยกเชื้อได้จากตัวอย่างสัตว์ป่วยตายด้วยโรคเมลิออยด์ ที่ผ่านการตรวจยืนยันด้วยวิธี PCR แล้วทำ checkerboard titration เพื่อหาสภาวะที่เหมาะสม ได้แก่ ชนิดของ blocking ระดับความเข้มข้นของแอนติเจน ซีรัม conjugate และระยะเวลาที่เหมาะสมในการ incubate แต่ละขั้นตอน และนำวิธี ELISA ที่พัฒนาขึ้นมาทดสอบซีรัมสัตว์จำนวน 15,081 ตัวอย่าง เปรียบเทียบกับวิธี IHA และ เพาะเชื้อจากตัวอย่างจากการผ่าซาก 35 ตัวอย่าง จากผลบวกโดยวิธี ELISA หรือ IHA แล้วคำนวณหาประสิทธิภาพ โดยหาความไว ความจำเพาะ และ ความถูกต้องของวิธี ELISA ผล: ชุดทดสอบสำเร็จรูปอีไลซ่าที่พัฒนาขึ้นสำหรับชันสูตรโรคเมลิออยด์ในปศุสัตว์ เปรียบเทียบกับวิธี IHA มีค่าความไว 70.39% ความจำเพาะ 99.46% และความถูกต้อง 99.11% และให้ผลบวกตรงกับการเพาะแยกเชื้อ 19 ตัว จาก 21 ตัวอย่าง คิดเป็น 90% สรุป: ชุดทดสอบสำเร็จรูปอีไลซ่าที่พัฒนาขึ้นสำหรับชันสูตรโรคเมลิออยโดซิสในปศุสัตว์ มีประโยชน์ต่อการทดสอบโรคสำหรับการติดเชื้อแบบเรื้อรัง โดยควรใช้ร่วมกับการตรวจทางซีรัมวิทยาวิธีอื่น เช่นวิธี IHA การนำชุดทดสอบไปใช้จะมีความคุ้มค่า และเหมาะสมสำหรับใช้ในประเทศ อย่างไรก็ตามชุดทดสอบนี้ยังต้องพัฒนาให้มีความความไว ความจำเพาะ และความถูกต้อง สูงขึ้น เพื่อใช้คัดกรองโรคอีกต่อไ

คำสำคัญ