รายงานฉบับสมบูรณ์พ.ศ. 2567

การพัฒนา Enzyme-linked Immunosorbent Assay (ELISA) และ Fluorescence Polarization Immunoassay (FPIA) เพื่อวิเคราะห์ปริมาณโปรตีนแพ้ในน้ำยางพาราและผลิตภัณฑ์

ผศ.ดร.ดร.สุมาลี อบเชย พ.ศ. 2567

ชื่อผู้แต่งข้างต้นเป็นข้อความจากระเบียนผลงาน ไม่ได้ผูกกับรหัสนักวิจัย จึงกดดูผลงานอื่นของบุคคลนี้ไม่ได้ — ในคลังนี้ 142,080 ผลงาน (63.6% ของทั้งหมด) มีชื่อผู้แต่งที่เชื่อมกับหน้าผู้แต่งได้ และ 60,298 ผลงาน (27.0%) มีผู้แต่งที่ผูกกับรหัสนักวิจัยจริง ส่วนอีก 81,382 ผลงานไม่มีข้อมูลผู้แต่งเลย (มีชื่อผู้แต่งเป็นข้อความอยู่ 142,009 ผลงาน = 63.5%)

บทคัดย่อ

เนื่องจากในน้ำยางมีโปรตีนกว่า 250 ชนิด และประมาณ 15 ชนิด จัดเป็นโปรตีนที่ก่อให้เกิดอาการแพ้ จึงจำเป็นต้องมีการวัดปริมาณโปรตีนในผลิตภัณฑ์ยางก่อนนำไปจำหน่าย ซึ่งชุดตรวจปริมาณโปรตีนแพ้ที่มีอยู่ในท้องตลาดขณะนี้คือ FITkit? จำเป็นต้องมีการนำเข้าจากต่างประเทศ ดังนั้น ผู้วิจัยจึงมีเป้าประสงค์ เพื่อพัฒนาวิธีการวัดปริมาณโปรตีนแพ้ในยางพาราและผลิตภัณฑ์โดยใช้หลักการ FI ISA ซึ่งจากการศึกษาวิจัยโครงการนี้สามารถผลิตโปรตีนลูกผสมของ Hev b1, Hev b3, Hev b5 และ Hev b6 จาก E. coli เพื่อใช้เป็นแอนติเจนสำหรับการสังเคราะห์แอนติบอดีที่จำเพาะต่อ Her b1, Hev b3, Hev b5 และ Hev b6.02 จนไปสู่การพัฒนาชุดตรวจหาปริมาณโปรตีนก่อแพ้ในตัวอย่างได้ โดยสภาวะที่เหมาะสมในการทำ ELISA คือการใช้โปรตีนลูกผสมบริสุทธิ์แต่ละชนิดเจือจางในบัฟเฟอร์เคลือบ pH 9.6 (สำหรับ Hev b1, Hev b3 และ Hev b5) และ pH 10.0 (สำหรับ Hev b6.02) ให้ได้ความเข้มข้นต่างๆ แล้วนำไปเคลือบผิวเพลทแล้วทำ ELISA โดยใช้เวลาในการบ่มแอนติเจนและแอนติบอดีเป็น 60 นาที (สำหรับ Hev b1. Hev b3 และ Hev b6.02) 45 นาที (สำหรับ Her b5) ในการคำนวณค่าความเข้มข้นของโปรตีนตัวอย่างทำโดยนำชุดข้อมูลค่ากาการดูดกลืนแสงที่ได้ทำ cubic spline it ด้วยโปรแกรม R และหาความเข้มข้นของโปรตีนตัวอย่าง ทำให้ชุดทดสอบที่ได้มีค่า LOD และ LOQ ตำ คือค่า LOD อยในช่วง 3-5 me/L และ LOQ อยู่ในช่วง 34-133 ug/L แสดงให้เห็นว่าชุดทดสอบมีประสิทธิภาพที่ดี เมื่อนำชุดตรวจวัดปริมาณโปรตีนแพ้ที่เตรียมได้วัดปริมาณโปรตีนแพ้ได้ทั้งในน้ำยางสดและผลิตภัณฑ์ โดยชุดทดสอบสามารถตรวจวัดปริมาณโปรตีนได้อย่างมีความเที่ยงตรง โดยชุดยชุดทดสอบทั้ง 4 ชุดมีค่า % RSD ไม่เกิน 1096 ทั้งหมด และมีค่า % recovery อยู่ในช่วง 94-110% เมื่อเมื่อเปรียบเทียบกับชุด FITkit? ที่มีขายในท้องตลาด ดังนั้นชุดทดสอบนี้สามารถนำมาพัฒนาต่อเพื่อลดการนำเข้าชุดทดสอบจากต่างประเทศ

คำสำคัญ

ELISANatural rubber latexโปรตีนก่อภูมิแพ้อิไลซ่า Allergenic proteinน้ำยางธรรรมชาติ

งานวิจัยในหัวข้อใกล้เคียง

การทดลองผลิตในระดับอุตสาหกรรมและการทดสอบทางคลินิกของถุงมือยางธรรมชาติโปรตีนต่ำเพื่อสร้างความเชื่อมั่นในการผลิตและการใช้งาน

ดร.อรวรรณ หิมานันโต พ.ศ. 2565

การประยุกต์ใช้เทคโนโลยีการแสดงโปรตีนบนผิวฟาจในการผลิตแอนติบอดีต่อสารปนเปื้อนโมเลกุลเล็กทางการเกษตร

มณฑารพ ยมาภัย สาขาวิชาเทคโนโลยีชีวภาพ มหาวิทยาลัยเทคโนโลยีสุรนารี พ.ศ. 2555

การพัฒนา ELISA เพื่อวิเคราะห์ปริมาณของแอนติบอดีที่จำเพาะต่อโปรตีนแพ้ในยางธรรมชาติ

ผศ.นพ.วรวิทย์ วาณิชย์สุวรรณ พ.ศ. 2566

การพัฒนาเทคโนโลยีการแสดงโปรตีนบนผิวฟาจ เพื่อการผลิตโมโนโคลนอลแอนติบอดี

มณฑารพ ยมาภัย สำนักวิชาเทคโนโลยีการเกษตร มหาวิทยาลัยเทคโนโลยีสุรนารี พ.ศ. 2552

การเตรียมแอนติบอดีชนิดโมโนโคลนาลที่เป็นโมเลกุลโปรตีนของมนุษย์โดยสมบูรณ์ต่อสารพิษเอนเทอโรท็อกซินชนิดเอของเชื้อสแตฟีโลค็อคคัส ออเรียส โดยเทตนิคฟาจดิสเพลย์ เพื่อการพัฒนาต่อไปสำหรับใช้ในการรักษาโรค

นิตยา อินทราวัฒนา มหาวิทยาลัยมหิดล พ.ศ. 2557

การวิเคราะห์เปรียบเทียบทางโปรตีนโอมิกในโคนมที่มีภาวะรกค้าง

ชิซิน ฟู พ.ศ. 2559

การพัฒนาชุดตรวจคัดกรองปริมาณโปรตีนในน้ำยางธรรมชาติและผลิตภัณฑ์

พันทิพา รุณแสง สำนักงานการวิจัยแห่งชาติ (วช.) พ.ศ. 2565

โครงการการศึกษาวิธีการวิเคราะห์ตรวจสอบโปรตีนในถุงมือยางทั้งเชิงปริมาณและคุณภาพ เพื่อพัฒนาการผลิตถุงมือยางทางการแพทย์ที่มีโปรตีนต่ำ

ดวงกมล วิรุฬห์อุดมผล สถาบันมาตรวิทยาแห่งชาติ พ.ศ. 2553

การประเมินการตอบสนองทางภูมิคุ้มกันต่อเป็ปไทด์ของโปรตีน ESAT-6 และโปรตีน CFP-10 ของเชื้อวัณโรคในการช่วยวินิจฉัยการติดเชื้อวัณโรคและระยะของโรค

บุษบัน เชื้ออินทร์ สถาบันบำราศนราดูร พ.ศ. 2551

การดัดแปรสมบัติของโปรตีนโดยใช้เอนไซม์โปรติเอสและการประยุกต์ใช้

เกียรติศักดิ์ ดวงมาลย์ จุฬาลงกรณ์มหาวิทยาลัย พ.ศ. 2557

Command Palette