การวิเคราะห์การทำงานของยีนที่ใช้ในการสังเคราะห์สารเคอร์คูมินอยด์ในขมิ้นชันโดย Rna interference
ชื่อผู้แต่งข้างต้นเป็นข้อความจากระเบียนผลงาน ไม่ได้ผูกกับรหัสนักวิจัย จึงกดดูผลงานอื่นของบุคคลนี้ไม่ได้ — ในคลังนี้ 142,080 ผลงาน (63.6% ของทั้งหมด) มีชื่อผู้แต่งที่เชื่อมกับหน้าผู้แต่งได้ และ 60,298 ผลงาน (27.0%) มีผู้แต่งที่ผูกกับรหัสนักวิจัยจริง ส่วนอีก 81,382 ผลงานไม่มีข้อมูลผู้แต่งเลย (มีชื่อผู้แต่งเป็นข้อความอยู่ 142,009 ผลงาน = 63.5%)
บทคัดย่อ
จากการตรวจเอกสารทราบว่า การสังเคราะห์สารเคอร์คูมินอยด์เกิดจากการทำงานร่วมกันของเอนไซม์ 2 ชนิด คือ diketide-CoA synthase (DCS) และ curcumin synthase (CURS) ทำให้ทราบวิถีการสังเคราะห์สารเคอร์คูมินอยด์ และมีรายงานการโคลนยีนทั้ง 2 ยีน ดังกล่าวแล้ว จึงออกแบบไพรเมอร์เพื่อเพิ่มปริมาณส่วนของยีน DCS และ CURS นำแต่ละยีนมาเชื่อมต่อกันแบบกลับทิศทางในพลาสมิดโดยใช้ระบบ Gateway recombination ถ่ายยีนเข้าสู่ขมิ้นโดยใช้เชื้อ Agrobacterium tumefaciens สายพันธุ์ EHA105 ที่มีพลาสมิด pSTARGATE ที่ตัดต่อยีนเรียบร้อยแล้ว เพื่อตรวจสอบการทำงานของยีนโดย RNA interference จากการถ่ายยีน DCS เข้าสู่ยอดอ่อนขมิ้นชันที่เพาะเลี้ยงในอาหาร MS ที่เติม BA 2มก./ล.สามารถคัดเลือกและตรวจพบต้นที่ได้รับการถ่ายยีนโดยวิธี PCR 3 ต้น มีแถบดีเอ็นเอต่างจากต้นที่ไม่ได้รับการถ่ายยีน ส่วนการถ่ายยีน CURS ยอดขมิ้นที่ได้ยังไม่มีการขยายตัว จึงยังไม่สามารถตรวจสอบดีเอ็นเอได้ และขมิ้นที่ได้รับการถ่ายยีนทั้งหมดเจริญเติบโตช้า จึงยังไม่สามารถตรวจสอบการแสดงออกของยีนได้ การเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อสามารถเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อขมิ้นชันให้ปลอดเชื้อและขยายยอดจำนวนมากสำหรับการถ่ายยีน และกระตุ้นให้มีการสร้างสารเคอร์คูมินอยด์ที่บริเวณโคนต้น แต่ไม่สามารถชักนำให้เกิดการสร้างเหง้าได้ จากการตรวจเอกสารทราบว่า การสังเคราะห์สารเคอร์คูมินอยด์เกิดจากการทำงานร่วมกันของเอนไซม์ 2 ชนิด คือ diketide-CoA synthase (DCS) และ curcumin synthase (CURS) ทำให้ทราบวิถีการสังเคราะห์สารเคอร์คูมินอยด์ และมีรายงานการโคลนยีนทั้ง 2 ยีน ดังกล่าวแล้ว จึงออกแบบไพรเมอร์เพื่อเพิ่มปริมาณส่วนของยีน DCS และ CURS นำแต่ละยีนมาเชื่อมต่อกันแบบกลับทิศทางในพลาสมิดโดยใช้ระบบ Gateway recombination ถ่ายยีนเข้าสู่ขมิ้นโดยใช้เชื้อ Agrobacterium tumefaciens สายพันธุ์ EHA105 ที่มีพลาสมิด pSTARGATE ที่ตัดต่อยีนเรียบร้อยแล้ว เพื่อตรวจสอบการทำงานของยีนโดย RNA interference จากการถ่ายยีน DCS เข้าสู่ยอดอ่อนขมิ้นชันที่เพาะเลี้ยงในอาหาร MS ที่เติม BA 2มก./ล.สามารถคัดเลือกและตรวจพบต้นที่ได้รับการถ่ายยีนโดยวิธี PCR 3 ต้น มีแถบดีเอ็นเอต่างจากต้นที่ไม่ได้รับการถ่ายยีน ส่วนการถ่ายยีน CURS ยอดขมิ้นที่ได้ยังไม่มีการขยายตัว จึงยังไม่สามารถตรวจสอบดีเอ็นเอได้ และขมิ้นที่ได้รับการถ่ายยีนทั้งหมดเจริญเติบโตช้า จึงยังไม่สามารถตรวจสอบการแสดงออกของยีนได้ การเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อสามารถเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อขมิ้นชันให้ปลอดเชื้อและขยายยอดจำนวนมากสำหรับการถ่ายยีน และกระตุ้นให้มีการสร้างสารเคอร์คูมินอยด์ที่บริเวณโคนต้น แต่ไม่สามารถชักนำให้เกิดการสร้างเหง้าได้