การพัฒนาอิมมูโนโครมาโตกราฟฟิคสตริปเพื่อตรวจสอบการปนเปื้อนของซีราลีโนนอย่างรวดเร็ว

บทคัดย่อ

ซีราลีโนนเป็นสารพิษที่ผลิตจากเชื้อรา Fusarium หลายสายพันธุ์ และทำให้เกิดปัญหาการปนเปื้อนกับเมล็ดและวัตถุดิบอาหารสัตว์ทั่วโลก วิธีการวิเคราะห์ซีราลีโนนโดยทั่วไปใช้เทคนิคโครมาโตกราฟี ได้แก่ thin layer chromatography (TLC), high performance liquid chromatography (HPLC) หรือ gas chromatography (GC) ซึ่งเป็นวิธีที่ต้องการผู้ชำนาญ เครื่องมือเฉพาะทาง และใช้เวลาในการวิเคราะห์นาน งานวิจัยนี้มีวัตถุประสงค์เพื่อผลิตชุดตรวจสอบแบบรวดเร็ว immunochromatographic strip (ICS) ซึ่งใช้งานง่ายและน่าเชื่อถือ โดยใช้โมโนโคลนอลแอนติบอดีที่จำเพาะต่อซีราลีโนนจากไฮบริโดมาโคลน ZN1 นำมาเพิ่มปริมาณ เตรียมให้บริสุทธิ์ และพ่วงกับอนุภาคทองเพื่อใช้เป็นแอนติบอดีในการตรวจสอบ ทดสอบความสามารถในการทำปฏิกิริยาด้วยวิธี dot immunobinding assay (DIBA) การเตรียม ICS ใช้โมโนโคลนอลแอนติบอดีที่พ่วงอนุภาคทองพ่นที่บริเวณ conjugate release pad ส่วนที่ test line และ control line ฉีดพ่นด้วยZEA-BSA และ rabbit anti-mouse antibody ตามลำดับ เมื่อทดสอบกับสารสกัดจากข้าวโพดและถั่วลิสงไม่พบปฏิกิริยารบกวนจากสารสกัดวัตถุดิบทั้งสอง วิธีการสกัด ZEA จากวัตถุดิบใช้ 70% Methanol และเจือจางใน sample buffer อัตราส่วน 1:4 ค่า cut-off ของการวิเคราะห์ตัวอย่างข้าวโพดที่มีการเติมซีราลีโนน คือ 100 ไมโครกรัม/กิโลกรัม การตรวจสอบด้วย ICS ใช้เวลา 15 นาทีในการเกิดปฏิกิริยา การทดสอบโดยใช้ตัวอย่างข้าวโพดที่ทราบปริมาณซีราลีโนนพบว่า ICS ให้ผลสอดคล้องกับผลที่ได้จากวิธี cELISA และ TLC

คำสำคัญ