การผลิตสารยับยั้งเอนไซม์ย่อยโปรตีนจากถั่วอะซูกิและการประยุกต์ใช้ในการปรับปรุงคุณภาพของเจลซูริมิ

บทคัดย่อ

จากการศึกษาการสกัดและการจำแนกคุณลักษณะของสารยับยั??งเอนไซม์ทริปซิน จากถัว?? อะซูกิ (Vignaangularis)พบว่า การสกัดเมล็ดถัว?? ด้วยสารละลายโซเดียมคลอไรด์ความเข้มข้น 0.5 โมลาร์สามารถเก็บเก??ียวสารยับยั??งเอนไซม์ทริปซินได้สูงกว่าการใช้ตัวทำละลายอ??ืนๆ (P<0.05) เวลาในการสกัด 30 นาทีเป็นเวลาท??ีเหมาะสมท??ีสุดในการสกัดสารยับยั??งเอนไซม์ทริปซินจากเมล็ด ถัว?? อะซูกิ (P<0.05) สารยับยั??งเอนไซม์ทริปซินจากเมล็ดถัว?? อะซูกิสามารถทำบริสุทธิ??โดยการให้ความ ร้อนที??อุณหภูมิ 90 องศาเซลเซียส เป็นเวลา 10 นาที ตามด้วยการตกตะกอนด้วยแอมโมเนียมซัลเฟ ตท??ีระดับความอิ??มตัว ร้อยละ 30-65 และการใช้เจลฟิลเตรชัน ชนิด SephacrylS-200โดยสารยับยั??งมี ผลผลิตร้อยละ 53.9 และความบริสุทธิ?? เพิ??มขึ??น 10.91 เท่า สารยับยั??งเอนไซม์ทริปซินมีน?? ำหนัก โมเลกุลเท่ากับ 14 กิโลดาลตัน เมื??อทำการตรวจสอบโดย SDS-PAGE และ inhibitory activity staining สารยับยั??งเอนไซม์ทริปซินท??ีผ่านการทำบริสุทธิ?? มีความตัวต่อพีเอชในช่วงกว้างและมี กิจกรรมการยับยั??งเอนไซม์ทริปซินเหลืออยู่สูงหลังจากให้ความร้อนท??ีอุณหภูมิ 90 องศาเซลเซียส เป็นเวลา 60 นาที โซเดียมคลอไรด์ที??ระดับความเข้มข้นร้อยละ 0-3 ไม่มีผลต่อกิจกรรมของสาร ยับยั??งเอนไซม์ทริปซินท??ีผ่านการทำบริสุทธิ??จากเมล็ดถัว?? อะซูกิ อย่างไรก็ตามกิจกรรมของสารยับยั??ง เอนไซม์ทริปซินสูญเสียเม??ือสารยับยั??งเอนไซม์ทริปซินทำปฎิกิริยากับ ?-mercaptoethanolก่อนทำ อิเลคโตรฟอรีซีส จากการศึกษาผลของสารยับยั??งเอนไซม์ทริปซินท??ีผ่านการทำบริสุทธิ??บางส่วนด้วย ความร้อนที??อุณหภูมิ 90 องศาเซลเซียส เป็นเวลา 10 นาที (TI) ต่อกิจกรรมการย่อยสลายโปรตีนและ สมบัติการเกิดเจลของปลาทรายแดง (Nemipterus bleekeri) พบว่า TI (ร้อยละ 0-3) มีกิจกรรมการ ยับยั??งเอนไซม์โปรตีเนสชนิดซาร์โคพลาสมิคและกิจกรรมการย่อยสลายตัวเองของเนื??อปลาทราย แดงบดท??ีผ่านและไม่ผ่านการล้างโดยขึ??นกับระดับความเข้มข้นของ TI ท??ีใช้ TI มีประสิทธิภาพใน การป้องกันการย่อยสลายโปรตีนโดยเห็นได้จากผลของ SDS-PAGE พบว่าแถบโปรตีนไมโอซิน เส้นหนัก (MHC) มีความเข้มของแถบโปรตีนสูงกว่า นอกจากนี??จากการศึกษาผลของ TI (ร้อยละ 0.5 1 2 และ 3) ต่อสมบัติการเกิดเจลของซูริมิปลาทรายแดง พบว่า ค่าแรงเจาะทะลุและระยะทาง ก่อนเจาะทะลุของเจลคามาโบโกะเพิ??มขึ??นเม??ือความเข้มข้นของ TI ท??ีเติมเพิ??มขึ??น โดยมีการลดลงของ ปริมาณเปปไทด์ที??ละลายได้ในกรดไตรคลอโรอะซิติก อย่างไรก็ตามค่าความขาวของเจลซูริมิมีค่า ลดลงเม??ือความเข้มข้นของ TI เพิ??มขึ??น ดังนั??น TI ท??ีระดับความเข้มข้นท??ีเหมาะสมสามารถใช้เป็น สารเติมแต่งทางเลือกใหม่ในซูริมิสำหรับปรับปรุงคุณภาพเจล คำสำคัญ: โปรตีเนส สารยับยั??งเอนไซม์ทริปซิน การจำแนกคุณลักษณะ การทำบริสุทธิ?? ซูริมิ

คำสำคัญ