การผลิตสารชีวภัณฑ์จากจุลินทรีย์ลำไส้ปลวกเพื่อการเกษตร พลังงาน และสิ่งแวดล้อม (ต่อเนื่อง ปีที่ 2)
ชื่อผู้แต่งข้างต้นเป็นข้อความจากระเบียนผลงาน ไม่ได้ผูกกับรหัสนักวิจัย จึงกดดูผลงานอื่นของบุคคลนี้ไม่ได้ — ในคลังนี้ 142,080 ผลงาน (63.6% ของทั้งหมด) มีชื่อผู้แต่งที่เชื่อมกับหน้าผู้แต่งได้ และ 60,298 ผลงาน (27.0%) มีผู้แต่งที่ผูกกับรหัสนักวิจัยจริง ส่วนอีก 81,382 ผลงานไม่มีข้อมูลผู้แต่งเลย (มีชื่อผู้แต่งเป็นข้อความอยู่ 142,009 ผลงาน = 63.5%)
บทคัดย่อ
งานวิจัยนีมีวัตถุประสงค์เพ!ือทำการศึกษาประชากรของแบคทีเรียในลำไส้ปลวกท!ีสามารถ ผลิตเอนไซม์เซลลูเลสและเอนไซม์ไซลาเนสได้ โดยนำตัวอย่างลำไส้ปลวกมาเพาะเลียงบนอาหาร 4 ชนิด ได้แก่ De Man Rogosa and Sharpe (MRS), Brain Heart Infusion (BHI), Tryptic Soy Agar (TSA) ในสภาวะไม่มีอากาศ และ Nutrient Agar (NA) ในสภาวะมีอากาศ จากการทดลองพบว่า สามารถแยกเชือแบคทีเรียลำไส้ปลวกได้ทังสิน 146 ไอโซเลต จากการจำแนกชนิดด้วยวิธีการหา ลำดับนิวคลีโอไทด์ของยีนส่วน 16S rRNA พบว่าแบคทีเรียทัง 146 ไอโซเลตสามารถจัดอยู่ใน 4 Phylum คือ Phylum Firmicutes (58.9%), Phylum Proteobacteria (34.9%), Phylum Actinobacteria (4.8%) และ Phylum Bacteroides (1.4%) หลังจากนำมาทดสอบความสามารถเบืองต้นในการผลิต เอนไซม์เซลลูเลสและเอนไซม์ไซลาเนส โดยวิธี congo red test พบว่ามีแบคทีเรียที!สามารถผลิต เอนไซม์เซลลูเลสได้จำนวน 15 ไอโซเลต และมีแบคทีเรียลำไส้ปลวกจำนวน 3 ไอโซเลตที!สามารถ ผลิตเอนไซม์ไซลาเนสได้ และจากการหาค่ากิจกรรมการทำงานและค่ากิจกรรมจำเพาะของเอนไซม์ พบว่าไอโซเลตที!มีประสิทธิภาพสูงสุดในการผลิตเอนไซม์เซลลูเลส คือ Breznakia pachnodae T1- 07 มีค่ากิจกรรมการทำงานของเอนไซม์เซลลูเลสเท่ากับ 32 mU/ml และมีค่ากิจกรรมจำเพาะของ เอนไซม์เซลลูเลสเท่ากับ 27.1 mU/mg โปรตีน และไอโซเลตที!มีประสิทธิภาพสูงสุดในการผลิต เอนไซม์ไซลาเนส คือ Microbacterium barkeri N5-06 มีประสิทธิภาพดีที!สุด คือ มีค่ากิจกรรมการ ทำงานของเอนไซม์ไซลาเนสเท่ากับ 292 mU/ml และมีค่ากิจกรรมจำเพาะของเอนไซม์เท่ากับ 16.06 mU/mg โปรตีนจากการทำการศึกษาการผลิตเอนไซม์เซลลูเลสของแบคทีเรีย Breznakia pachnodae T1-07 และการผลิตเอนไซม์ไซลาเนสของแบคทีเรีย Microbacterium barkeri N5-06 จากวัสดุเหลือทิงทาง การเกษตร โดยคัดเลือกปัจจัยที!ส่งผลกระทบต่อการผลิตเอนไซม์เซลลูเลสและไซลาเนสโดยการวาง แผนการทดลองแบบ Plackett and Burman Design และ นำปัจจัยที!ให้ผลในเชิงบวกและต้องการไป ศึกษาหาระดับที!เหมาะสมต่อการผลิตเอนไซม์เซลลูเลสโดยวิธี Central composite design และวิธี Box–Behnken designs สำหรับเอนไซม์ไซลาเนส จากผลการทดลองพบว่าแบคทีเรีย Breznakia pachnodae T1-07 สามารถผลิตเอนไซม์เซลลูเลสโดยให้ค่ากิจกรรมการทำงานของเอนไซม์เซลลูเล สสูงที!สุดที! 2.79 U/ml โดยมีส่วนประกอบของสารอาหารดังนี้ คือ รำข้าวสาลี skim milk, K2HPO4, KCl และ NaNO3 ในปริมาณเท่ากับ 13.7, 15.2, 0.5, 5.0 และ 0.5 กรัม/ลิตร ตามลำดับ และปริมาณ ของหัวเชือท!ีใช้ เท่ากับ 1% (v/v) ทำการบ่มท!ีอุณหภูมิ 45 องศาเซลเซียส โดยเขย่าท!ีความเร็ว 150 รอบ/นาที เป็นเวลา 120 ชั!วโมง สำหรับเอนไซม์ไซลาเนส พบว่าแบคทีเรีย Microbacterium barkeri N5-06 สามารถผลิตเอนไซม์ไซลาเนส โดยให้ค่ากิจกรรมการทำงานของเอนไซม์ไซลาเนส สูงที!สุด ท!ี 1.27 U/ml โดยมีค่าทำนายท!ีเหมาะสมของปริมาณ กากถัว! เหลือง และ รำข้าว ท!ีใช้คือ 11 และ 17 g/l ตามลำดับ และค่าความเป็นกรด-ด่างที! pH 7.87 จะทำให้ได้ปริมาณเอนไซม์ไซลาเนส สูงสุด เท่ากับ 0.49 Unit/ml เม!ือทำการเพาะเลียงเพ!ือยืนยันผลพบว่ามีค่า 1.27 Unit/ml เม!ือทำการศึกษาหา เวลาท!ีเหมาะสมพบว่าท!ีชัว! โมง 30 ค่ากิจกรรมของเอนไซม์มีค่าสูงท!ีสุดเท่ากับ 1.27 Unit/ml