การพัฒนาสารสกัดจากเมล็ดส้มในการทำให้เซลล์มะเร็งตับตายแบบอะพอพโทซิส

บทคัดย่อ

ฟลาโวนอยด์เป็นสารที่มีสีพบในพืชหรือดอกไม้ เปลือกและเมล็ดส้มเต็มไปด้วยสารประกอบฟีนอลิค เช่น ฟลาโวนอยด์ และกรดฟีนอลิก ทั้งเปลือกและเมล็ดส้มไม่มีคุณค่าและถูกนำไปทิ้ง ซึ่งอาจจะมีสารฟลาโวนอยด์และมีฤทธิ์ต้านมะเร็ง จุดประสงค์ของการศึกษานี้เพื่อจะหาประเภทของสารฟลาโวนอยด์ในสารสกัดเมล็ดส้ม และผลความเป็นพิษ รวมทั้งชนิดของการตายในเซลล์มะเร็งตับมนุษย์ HepG2 ผลการทดลองพบว่าในเมล็ดส้มมีสาร neohesperidine, hesperidine และ naringin เป็นองค์ประกอบหลักของไบโอฟลาโวนอยด์ โดยสามารถสกัดได้สาร 17.11, 7.69 และ 20.30% w/w ตามลำดับ โดยเทคนิค HPLC สารสกัดหยาบของเมล็ดส้มมีความเป็นพิษต่อเซลล์ HepG2 แต่น้อยกว่าไบโอฟลาโวนอยด์ และสารบริสุทธิ์แต่ละชนิด สารแต่ละชนิดมีความเป็นพิษต่อเซลล์มะเร็งตับโดยขึ้นกับความเข้มข้น และหาค่า IC50 โดยเซลล์มะเร็งตับ HepG2 ถูกกระตุ้นให้ตายโดย naringin > hesperidin > neohesperidin > naringenin โดยที่ค่า IC50 ของ hesperidin และ naringin เท่ากับ 150.43+12.32 และ 172.0+10.39 ?M ตามลำดับ แต่สารตัวอื่นไม่สามารถหาค่าได้ คือ > 200 ?M สาร Hesperidine ไม่มีผลต่อการสร้าง reactive oxygen species (ROS) ในเซลล์ HepG2 ตรวจโดยใช้สาร 2’,7,-dichlorofluorescein diacetate และเทคนิค flow cytometry จำนวนเซลล์ที่ตายโดยมีการลดลงของศักย์ไฟฟ้าที่ผิวเยื่อบุของไมโทคอนเดรียมีการเพิ่มขึ้น ตรวจโดยใช้สาร 3,3’-dihexyloxacarbocyanine iodide และเครื่องflow cytometer โดยสรุป สารไบโอฟลาโวนอยด์จากเมล็ดส้มมีความเป็นพิษต่อเซลล์มะเร็งตับ HepG2 และ hesperidine เหนี่ยวนำให้เกิดการลดลงของศักย์ไฟฟ้าที่เยื่อบุผิวของไมโทคอนเดรีย ดังนั้น hesperidine เหนี่ยวนำเซลล์ HepG2 ให้ตายแบบอะพอพโทซิสโดยผ่านทางวิถีไมโทคอนเดรีย คำหลัก: เมล็ดส้ม ความเป็นพิษ การตายแบบอะพอพโทซิส มะเร็ง เซลล์ HepG2 ไบโอฟลาโวนอยด์ สาร Hesperidine สาร Naringin

คำสำคัญ