การตรวจและการจำแนกเชื้อ Salmonella Enteritidis, S. Anatum, S. Derby และ S. Ratchaburi ในระดับซีโรวาร์ที่พบในอาหารโดยใช้วิธีพีซีอาร์
ชื่อผู้แต่งข้างต้นเป็นข้อความจากระเบียนผลงาน ไม่ได้ผูกกับรหัสนักวิจัย จึงกดดูผลงานอื่นของบุคคลนี้ไม่ได้ — ในคลังนี้ 142,080 ผลงาน (63.6% ของทั้งหมด) มีชื่อผู้แต่งที่เชื่อมกับหน้าผู้แต่งได้ และ 60,298 ผลงาน (27.0%) มีผู้แต่งที่ผูกกับรหัสนักวิจัยจริง ส่วนอีก 81,382 ผลงานไม่มีข้อมูลผู้แต่งเลย (มีชื่อผู้แต่งเป็นข้อความอยู่ 142,009 ผลงาน = 63.5%)
บทคัดย่อ
การตรวจและจำแนกเชื้อ Salmonella โดยใช้เทคนิคพีซิอาร์ ได้ออกแบบไพรเมอร์ที่มีความจำเพาะต่อ chromosomal invasion gene ของเชื้อ Salmonella พบว่าไพรเมอร์ที่ออกแบบมีความจำเพาะสูง โดยเพิ่มขยายขนาดดีเอ็นเอของเชื้อ Salmonella (740 bp) แต่ไม่เพิ่มขยายดีเอ็นเอของเชื้อแบคทีเรียสายพันธุ์อื่น และมีความไวสามารถตรวจหาเชื้อ Salmonella ได้ในระดับ 1.0 ng/?l จากนั้นทำโคลนยีน 16S ribosomal RNA (16S rRNA) ของเชื้อ Salmonella Enteritidis, S. Anatum, S. Derby และS. Ratchaburi นำมาวิเคราะห์และเปรียบเทียบลำดับนิวคลีโอไทด์ เพื่อการออกแบบไพรเมอร์ที่บริเวณจำเพาะต่อ 16S rRNA ของเชื้อ Salmonella แต่ละสายพันธุ์ พบว่าไพรเมอร์ที่ออกแบบไม่สามารถจำแนกเชื้อในระดับซีโรวาร์ได้ งานวิจัยนี้ได้นำเทคนิคอาร์เอพีดี-พีซีอาร์ (Ramdomly amplified polymorphic DNA-polymerase chain reaction, RAPD-PCR) มาใช้ในการจำแนกเชื้อ Salmonella โดยใช้ 4 ไพรเมอร์ ได้แก่ OPI-06, 23L, OPB-17 และ OPA-4 พบว่ารูปแบบลายพิมพ์ดีเอ็นเอของไพรเมอร์ OPI-06 มีความหลากหลายแต่ไม่สามารถจำแนกเชื้อ Salmonella และการพัฒนาวิธี multiplex PCR โดยใช้ไพรเมอร์ 8 คู่ ที่มีความจำเพาะต่อ O-antigen gene clusters ของเชื้อ Salmonella ผลการศึกษาพบว่าไพรเมอร์เพิ่มขยายขนาดดีเอ็นเอที่จำเพาะต่อเชื้อ S. Enteritidis (615 bp), S. Ratchaburi (154 และ 230 bp) และ S. Derby (230 bp) ได้ ดังนั้นวิธีพีซีอาร์สามารถนำไปประยุกต์ใช้เพื่อตรวจเชื้อ Salmonella ที่มีความจำเพาะสูง ให้ผลรวดเร็ว