การศึกษาปัจจัยที่มีผลต่อคุณภาพน้ำเชื้อคัดแยกเพศในพ่อพันธุ์แพะเนื้อ
ชื่อผู้แต่งข้างต้นเป็นข้อความจากระเบียนผลงาน ไม่ได้ผูกกับรหัสนักวิจัย จึงกดดูผลงานอื่นของบุคคลนี้ไม่ได้ — ในคลังนี้ 142,080 ผลงาน (63.6% ของทั้งหมด) มีชื่อผู้แต่งที่เชื่อมกับหน้าผู้แต่งได้ และ 60,298 ผลงาน (27.0%) มีผู้แต่งที่ผูกกับรหัสนักวิจัยจริง ส่วนอีก 81,382 ผลงานไม่มีข้อมูลผู้แต่งเลย (มีชื่อผู้แต่งเป็นข้อความอยู่ 142,009 ผลงาน = 63.5%)
บทคัดย่อ
วัตถุประสงค์ของงานวิจัยนี้เพื่อศึกษาความเป็นไปได้ในการคัดแยกเพศน้ำเชื้อพ่อแพะเนื้อเพิ่มสัดส่วนอสุจิที่มีโครโมโซมวายด้วยอุปกรณ์ Microfluidic chip โดยทำการศึกษาความสมบูรณ์พันธุ์ของแพะเนื้อจำนวน 5 ตัว ตรวจคุณภาพน้ำเชื้อด้วยเครื่อง Computer-Assisted Sperm Analysis (CASA) และบันทึกความสมบูรณ์พันธุ์ของพ่อแพะแต่ละตัว จำนวน 1 ครั้ง ผลจากการศึกษาพบว่ามีพ่อแพะที่มีน้ำเชื้อคุณภาพดีสามารถนำไปทดสอบต่อได้ 3 ตัว ได้แก่ 1) ไจแอนท์ (คณิตฟาร์ม) 2) ไจแอนท์ (นวพรรณฟาร์ม) และ 3) ดอม (นวพรรณฟาร์ม) จากนั้นทำการออกแบบไพรเมอร์ และนำไปทดสอบการเพิ่มปริมาณดีเอ็นเอเป้าหมายโดยใช้เทคนิคมัลติเพล็กซ์เรียลไทม์พีซีอาร์ (Multiplex Real time PCR) ได้ชุดไพรเมอร์ที่มีความจำเพาะต่อยีน SRY บนโครโมโซมวายของเพศผู้ (SRY3) และไพรเมอร์ที่มีความจำเพาะต่อยีน AMLX บนโครโมโซมเอ็กซ์ในเพศเมีย (AMLX1) จากการทดสอบได้ปรับความเข้มข้นของไพรเมอร์ในระบบ Multiplex ให้มีความเหมาะสมคือ SRY1: AMLX1 เท่ากับ 400 nM: 200nM โดยในการศึกษานี้ได้แสดงการเพิ่มปริมาณดีเอ็นเอผลลัพธ์ด้วยสีฟลูออเรสเซนต์ติดที่โพรบ Taqman ซึ่งโพรบของยีน SRY ติดสี FAM และโพรบของยีน AMLX ติดสี HEX และใช้ดีเอ็นเออ้างอิงจากเซลล์เม็ดเลือดขาวของแพะเพศผู้ ซึ่งมีอัตราส่วนของโครโมโซมเอ็กซ์และโครโมโซมวายที่เท่ากัน นำมาสร้างเป็นกราฟเส้นตรงมาตรฐาน ได้กราฟเส้นตรงมาตรฐานของยีน AMLX และ ยีน SRY แสดงสมการเชิงเส้นสองสมการสำหรับคำนวณ %X : %Y โดยมีค่าความชันเฉลี่ยของกราฟเส้นตรงทั้งสองเท่ากับ -3.70 แสดงถึงปฏิกิริยาที่มีประสิทธิภาพสูงในการสร้างดีเอ็นเอเส้นใหม่ (93-94%) ซึ่งเทคนิคที่ได้พัฒนาขึ้นนี้สามารถประยุกต์ใช้สำหรับการตรวจระบุสัดส่วนเพศอสุจิในน้ำเชื้อพ่อแพะในระดับห้องปฏิบัติการได้ สำหรับการสร้างอุปกรณ์ต้นแบบ Microfluidic chip เพื่อการคัดแยกเพศอสุจิวาย ได้ทำการออกแบบอุปกรณ์ได้จำนวน 3 ต้นแบบ โดยอุปกรณ์ต้นแบบที่ 1 ใช้เทคโนโลยีเอ็กเรย์ลิโทกราฟี (X-ray lithograyphy) และอุปกรณ์ต้นแบบที่ 2 และ 3 ใช้หลักการ Soft Photolithography และทำการทดสอบการคัดเพศน้ำเชื้อพ่อแพะ จำนวน 3 ตัว พบว่าอุปกรณ์แบบที่ 1 พ่อแพะไจแอนท์ (นวพรรณฟาร์ม) ให้ผลการคัดแยกอสุจิวายได้สูงสุดประมาณ 61.13% อุปกรณ์แบบที่ 2 พ่อแพะไจแอนท์ (คณิตฟาร์ม) ให้ผลการคัดแยกอสุจิวายได้สูงสุดประมาณ 52.06% และอุปกรณ์แบบที่ 3 พ่อแพะไจแอนท์ (คณิตฟาร์ม) ให้ผลการคัดแยกเพศอสุจิวายได้มากที่สุดคือ 80.96% คำสำคัญ: แพะเนื้อ อสุจิ น้ำเชื้อคัดเพศ อุปกรณ์ไมโครฟลูอิดิกชิปส์