การศึกษาเพื่อพัฒนาการผลิตน้ำเชื้อแช่แข็งและการผสมเทียมแพะ

บทคัดย่อ

การศึกษาเพื่อเพิ่มประสิทธิภาพการผลิตน้ำเชื้อแพะแช่แข็งประกอบด้วย 4 วัตถุประสงค์ด้วยกันคือ 1) เพื่อศึกษาผลของการเสริมด้วยไข่แดงเข้มข้นต่างระดับในสารละลายน้ำเชื้อชนิดทริส(tisbased extender ) ต่อคุณภาพน้ำเชื้อก่อนแช่แข็ง 2) เพื่อศึกษาผลของการใช้กลีเซอรอล (sycerol เข้มข้นต่างกันต่อคุณภาพ น้ำเชื้อก่อนแช่แข็ง 3) เพื่อศึกษาผลของการใช้โปรแกรมการแช่แข็งชนิดต่างกันต่อคุณภาพน้ำเชื้อแช่แข็งและทำ ละลาย และ 1) เพื่อศึกษาผลของการใช้อุณหภูมิในการทำละลายน้ำเชื้อแช่แข็งต่างกันต่อคุณภาพน้ำเชื้อแช่แข็ง งานทดลองที่ 1 การศึกษาการเสริมไข่แดงไก่เข้มข้นต่างระดับ วางแผนการทดลองแบบ CRD ใช้น้ำเชื้อแพะที่ รวบรวมจากจากพ่อแพะ 7 ตัว เป็นหน่วยทดลอง เจือจางน้ำเชื้อให้อสุจิเข้มข้น 500 X 10 ตัว /โด็ส ด้วย สารละลาย tis มีระดับของไข่แดงไก่เป็นทรีตเมนต์ 5 ระดับ คือ 0, 4, 8, 12 และ 16 เปอร์เซ็นต์ ลดอุณหภูมิ น้ำเชื้อให้เหลือ 5 องศาเซลเซียส ภายหลังเก็บน้ำเชื้อไว้ชั่วโมงที่ 2 พบว่า น้ำเชื้อกลุ่มที่เจือจางด้วยไข่แดง 0, 4 และ 12 เปอร์เซ็นต์ มีเปอร์เซ็นต์อสุจิเคลื่อนที่สูงกว่าใช้ไข่แดงไก่ 8 และ 16 อย่างมีนัยสำคัญยิ่ง (p 0.01) กลุ่มที่เจือจางด้วยไข่แดง ระดับอื่น งนทดลองที่ 2 การศึกษาความเข้มข้นของกลีเซอรอล วางแผนการทดลองแบบสุ่มตลอด(CRDโดยใช้ น้ำเชื้อแพะชุดเดียวกัน และเข้มข้นเท่ากับงานทดลองแรก เจือจางน้ำเชื้อด้วยสารละลาย tis ร่วมกับไข่แดงไก่ 12 เปอร์เซ็นต์ สุ่มแบ่งน้ำเชื้อให้กับทรีตมนต์ ซึ่งมีระดับของกลีเซอรอลเป็นทรีตเมนต์ 4 ระดับ คือ 3, 5, 7 และ เปอร์เซ็นต์ทำการลดอุณหภูมิลงให้เหลือ องคาเซลเชียส ตรวจคุณภาพน้ำเชื้อแพะก่อนแช่แข็ง ผลการตรวจ คุณภาพในชั่วโมงที่ 1 พบว่า มีเปอร์เซ็นต์การเคลื่อนที่ของอสุจิที่เจือจางด้วยกลีเซอรอลที่ ระดับ 5, 7 และ 9 เปอร์เซ็นต์ ให้คุณภาพสูงกว่า (P< 0.01) การเจือจางที่ 3 เปอร์เซ็นต์ และเปอร์เซ็นต์การรอดชีวิตของอสุจิที่เจือ จางด้วยกลีเซอรอลที่ ระดับ 3, 5 และ 7 เปอร์เซ็นต์ ให้คุณภาพสูงกว่า (< 0.01 ) การเจือจางที่ 9 เปอร์เซ็นต์ ใน ชั่วโมงที่ 3 พบว่า เปอร์เซ็นต์การเคลื่อนที่และเปอร์เซ็นต์การรอดชีวิตของอสุจิที่เจือจางด้วยกลีเซอรอลที่ ระดับ 3,5 และ7 เปอร์เซ็นต์ มีคุณภาพสูงกว่า (<< 0.01) การเจือจางที่ 9 เปอร์เซ็นต์ งานทดลองที่ 3 การศึกษาการ โปรแกรมการแช่แข็ง โดยใช้สารละลายน้ำเชื้อ tis ร่วมกับกลีเซอรอล 7 เปอร์เซ็นต์ และการเสริมไข่แดง 12 เปอร์เซ็นต์ วางเผนการทดลองแบบสุ่มตลอด (CRD) มีวิธีการแช่แข็งเป็นทรีตเมนต์ คือ 1) การแช่แข็งขั้นตอน เดียว 2) การแช่แข็งแบบ 2 ขั้นตอน และ 3) การแช่แข็งแบบ 3 ขั้นตอน ทำการแช่แข็งน้ำเชื้อและเก็บรักษาไว้ 7 วัน ผลการศึกษพบว่า ภายหลังทำละลาย และมื่อก็บรักษาไว้ 1 ชั่โมง โปรแกรมการแช่แข็งทั้ง 3 แบบ ส่งผล ให้ตัวอสุจิเคลื่อนที่รายตัวไม่แตกต่างกัน และจากการย้อมสีเพื่อตรวจการมีชีวิตรอดของอสุจิพบว่าให้ผลเป็นไป ในแนวทางเดียวกันคือการแช่แข็งทั้ง 3 แบบส่งผลให้มีตัวอสุจิรอดไม่แตกต่างกัน งานทดลองที่ 4 การศึกษา อุณหภูมิในการละลายน้ำเชื้อแช่แข็ง วางเผนการทดลองแบบ CRD ใช้น้ำเชื้อแพะแช่แข็งที่ผ่านการแช่แข็งแบบ 3ขั้นตอนป็นหน่วยทดลอง มีอุณหภูมิในการทำละลายเป็นทรีตมนต์ คือ การละลายที่อุณหภูมิ 37C 30 วินาที การละลายที่อุณหภูมิ 80?C 5วินาทีจุ่ม 38?C 30 วินาที และการละลายที่อุณหภูมิ 70?C 7 วินาทีจุ่ม 37?C 30 วินาที จากการตรวจคุณภาพน้ำเชื้อแพะพบว่า เปอร์เซ็นต์การเคลื่อนที่และอัตราการรอดชีวิตของอสุจิภายหลัง แช่แข็งและทำละลาย(ชั่วโมงที่ 0) ไม่แตกต่างกัน แต่ภายหลังทำละลายในชั่วโมงที่ 1 พบว่า เปอร์เซ็นต์การ เคลื่อนที่ของตัวอสุจิของการละลายที่อุณหภูมิ 80?C 5 วินาทีจุ่ม 38?C 30 วินาที และการทำละลายที่อุณหภูมิ 70?C นาน 7 วินาทีจุ่ม 37?C 30 วินาที มีตัวอสุจิเคลื่อนที่สูงกว่า(p<0.05) การทำละลายในอุณหภูมิ 37?C นาน 30 วินาที คือ 30.85?230 38.5?6.61 และ 11.16?583 เปอร์เซ็นต์ ตามลำดับ แต่อัตราการรอดชีวิตจากการ ย้อมสีไม่แตกต่างกัน จากการศึกษาครั้งนี้ชี้ให้เห็นว่า การเตรียมสารละลายเพื่อใช้แช่แข็งน้ำเชื้อแพะถ้าใช้สูตร tis ควรเติม ไข่แดงไก่ 12 เปอร์เซ็นต์ ร่วมกับการใช้กลีเซอรอล 7 เปอร์เซ็นต์ เมื่อทำการแช่แข็งควรเลือกใช้การแช่งแบบ 3 ขั้นตอน และเมื่อทำละลายน้ำเชื้อครเลือกใช้วิธีการละลายที่ 70?C นาน 7 วินาทีจุ่ม 37?C 30 วินาที

คำสำคัญ