การปรับปรุงพันธุ์ข้าวพื้นเมืองของจังหวัดเพชรบุรีให้มีกลิ่นหอมด้วยเทคนิคคริสเปอร์

บทคัดย่อ

ผลการดำเนินงานในโครงการวิจัยเรื่อง การปรับปรุงพันธุ์ข้าวพื้นเมืองของจังหวัดเพชรบุรีให้มีกลิ่นหอมด้วยเทคนิคคริสเปอร์ โดยอาศัยหลักการของการดัดแปลงยีนbadh2 เพื่อให้เอนไซม์ BADH2 ที่ถูกสร้างขึ้นจากยีนนี้ผิดปกติไปจนทำให้เกิดกลิ่นขึ้น แบ่งขั้นตอนการวิจัยออกเป็น 4 หัวข้อหลัก ได้แก่ การคัดเลือกพันธุ์ข้าวที่เหมาะสม การสร้างพลาสมิดสำหรับถ่ายยีน การเหนี่ยวนำแคลลัสในข้าว และการถ่ายยีนและคัดเลือกต้นข้าว ในช่วงระยะเวลา 6 เดือนแรก การคัดเลือกพันธุ์ข้าวที่เหมาะสมสำหรับงานวิจัยนี้ได้จำนวน 3 สายพันธุ์ได้แก่ ไร่มะขาม ข้าวเหนียวก้นจุด และเหลืองตาปลื้ม โดยนำเมล็ดข้าวดังกล่าวมาฟอกฆ่าเชื้อและเหนี่ยวนำให้เกิดเป็นแคลลัสด้วยเทคนิคการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อพืช ซึ่งข้าวเหนียวก้นจุดสามารถเหนี่ยวนำเป็นแคลลัสได้ไวที่สุด สำหรับการสร้างพลาสมิด ใช้การออกแบบสำหรับอาร์เอ็นเอนำทางด้วยโปรแกรม CRISPOR ได้ตำแหน่งที่เหมาะสมทั้งสิ้น 5 ตำแหน่ง และทำการต่อเข้ากับเวคเตอร์ pRGEB32 เพิ่มปริมาณในแบคทีเรีย และถ่ายเข้าสู่อะโกรแบคทีเรียม ซึ่งประสบความสำเร็จทั้ง 5 แบบ โดยในขั้นตอนการดำเนินการต่อไป จะเป็นการถ่ายพลาสมิดเข้าสู่แคลลัสของข้าวทั้ง 3 สายพันธุ์ เพื่อทำการคัดเลือกและเหนี่ยวนำข้าวที่ได้รับชิ้นส่วนดีเอ็นเอเข้าไปในจีโนมให้เป็นข้าวต้นแบบต่อไป

คำสำคัญ