การพัฒนาชุดตรวจ dual strip test สำหรับไวรัสโรคตัวแดงดวงขาว (WSSV) และไวรัสโรคหัวเหลือง (YHV)
ชื่อผู้แต่งข้างต้นเป็นข้อความจากระเบียนผลงาน ไม่ได้ผูกกับรหัสนักวิจัย จึงกดดูผลงานอื่นของบุคคลนี้ไม่ได้ — ในคลังนี้ 142,080 ผลงาน (63.6% ของทั้งหมด) มีชื่อผู้แต่งที่เชื่อมกับหน้าผู้แต่งได้ และ 60,298 ผลงาน (27.0%) มีผู้แต่งที่ผูกกับรหัสนักวิจัยจริง ส่วนอีก 81,382 ผลงานไม่มีข้อมูลผู้แต่งเลย (มีชื่อผู้แต่งเป็นข้อความอยู่ 142,009 ผลงาน = 63.5%)
บทคัดย่อ
การทดสอบแบบแถบสำหรับการตรวจจับไวรัสโรคจุดขาว (WSSV) และไวรัสหัวเหลือง (YHV) ทั้งสองชนิดได้รับการพัฒนาโดยใช้แอนติบอดีโมโนโคลนอล (MAbs) ที่จำเพาะต่อโปรตีนเยื่อหุ้มหลักของ WSSV VP28 (W1 และ W30) และโปรตีนนิวคลีโอแคปซิด p20 ของ YHV (Y19 และ Y21) MAbs W30 และ Y19 ถูกจับคู่กับทองคำคอลลอยด์และพ่นลงบนแผ่นใยแก้วที่วางอยู่ติดกับห้องเก็บตัวอย่าง MAbs W1 และ Y21 และแอนติบอดีแพะต่ออิมมูโนโกลบูลิน G (GAM) ถูกพ่นลงบนเมมเบรนไนโตรเซลลูโลสในแถบที่ตำแหน่งที่กำหนด W, Y และ C ตามลำดับ แถบทดสอบเหล่านี้ถูกวางไว้ในกล่องพลาสติกและเก็บในถุงพลาสติกที่แห้งสนิท แถบทดสอบได้รับการประเมินความสามารถในการตรวจจับ WSSV และ YHV พร้อมกันโดยใช้เพลโอพอดที่เก็บตัวอย่างจากกุ้ง โปรตีนที่จับกับโปรตีนในบัฟเฟอร์ขนาด 100 ลิตรจะถูกนำไปทาลงในห้องตัวอย่างเพื่อให้ไหลผ่านแถบไนโตรเซลลูโลสเมมเบรน และจะสังเกตเห็นคอมเพล็กซ์แอนติบอดี-โปรตีนภายใน 15 นาที ในตัวอย่างกุ้งที่ติดเชื้อ WSSV และ/หรือ YHV โปรตีนของไวรัสจะจับกับ MAbs ที่จับกับทองคำคอลลอยด์ คอมเพล็กซ์เหล่านี้จะถูก MAbs จับที่เส้นทดสอบ W และ/หรือ Y ส่งผลให้เกิดแถบสีม่วงแดง MAbs ที่จับกับทองคำคอลลอยด์ที่ไม่จับกันซึ่งอพยพผ่านเส้นทดสอบ W และ Y จะถูกจับโดยแอนติบอดี GAM ทำให้เกิดแถบที่ตำแหน่ง C เมื่อตัวอย่างไม่มีโปรตีน WSSV และ YHV หรือมีโปรตีนของไวรัสต่ำกว่าขีดจำกัดการตรวจจับของการทดสอบ จะสังเกตเห็นเฉพาะแถบที่ตำแหน่ง C เท่านั้น ความไวของการทดสอบนั้นเทียบได้กับการทดสอบแบบ dot blot ที่ใช้ MAbs เดี่ยว และมีความไวน้อยกว่าการทดสอบ 1-step PCR ประมาณ 500 เท่าสำหรับ WSSV และน้อยกว่าการทดสอบ RT-PCR ถึง 1,000 เท่าสำหรับ YHV แม้จะมีความไวต่ำกว่านี้ การทดสอบแบบแถบคู่ก็มีข้อได้เปรียบในด้านความเร็วและความเรียบง่าย เพราะไม่ต้องใช้อุปกรณ์ที่ซับซ้อนหรือทักษะเฉพาะทาง ความสามารถในการตรวจจับ WSSV และ YHV ร่วมกันทำให้ประหยัดต้นทุนได้ในเวลาเดียวกัน