การวิเคราะห์การแสดงออกของโปรตีน ARNTL2 เพื่อใช้เป็นตัวบ่งชี้ทางชีวภาพของมะเร็งปากมดลูก

บทคัดย่อ

ปัสสาวะ เป็นของเหลวที่ถูกขับออกนอกร่างกายที่นำไปใช้ง่าย ไม่รุกล้ำร่างกาย เหมาะกับงานวิจัยทางคลินิก องค์ประกอบโปรตีนในปัสสาวะ ใกล้เคียงกับในเลือด สามารถใช้ทดแทนสำหรับการแสวงหาตัวบ่งชี้ทางชีวภาพ (biomarkers) จากโปรตีนในเลือด การบ่งชี้โปรตีนในปัสสาวะ อาจจะนำไปสู่การค้นพบตัวบ่งชี้ทางชีวภาพ สามารถนำมาใช้ประโยชน์ในการตรวจรักษาโรคต่างๆ งานวิจัยก่อนหน้านี้ มีการใช้เทคนิคทางโปรติโอมิคส์ เพื่อหาตัวบ่งชี้ทางชีวภาพสำหรับวินิจฉัยมะเร็งปากมดลูกในตัวอย่างปัสสาวะ การเปรียบเทียบผลการวิเคราะห์ด้วยเทคนิคเจลอิเลคโตรโฟรีซีสแบบสองมิติ ในตัวอย่างปัสสาวะของคนปกติ และผู้ป่วยมะเร็งปากมดลูก พบโปรตีนที่เป็นตัวบ่งชี้มะเร็งเบื้องต้น ได้แก่ Protocadherin-8, Aryl hydrocarbon receptor nuclear translocator-like protein 2 (ARNTL2), Serum albumin และ Basement membrane-specific heparan sulfate proteoglycan core protein (perlecan) เพิ่มขึ้นในตัวอย่างปัสสาวะของผู้ป่วยมะเร็งปากมดลูก นอกจากนี้การบ่งชี้โปรตีนที่พบเหล่านี้ ได้ตรวจยืนยันโดยการวิเคราะห์ด้วยเวสเทิร์นบลอท พบปริมาณของโปรตีน ARNTL2 เพิ่มขึ้นในตัวอย่างปัสสาวะของผู้ป่วยมะเร็งปากมดลูก และได้มีการใช้เทคนิค 1D SDS-PAGE การย่อยด้วยเอนไซม์ ทริปซิน และ NanoLC-MS/MS เพื่อตรวจยืนยันโปรตีน ARNTL2 ที่มีมวลโมเลกุล 55 kDa พบว่าเป็นโปรตีน Serum albumin Basement membrane-specific heparan sulfate proteoglycan core protein (Endorepellin LG3 fragment) เป็นโปรตีนที่น่าสนใจ และนำมาศึกษาบทบาทหน้าที่ที่เกี่ยวข้องกับโรคมะเร็งปากมดลูกต่อไป คณะผู้วิจัยได้ตรวจระดับการแสดงออกของโปรตีน Endorepellin LG3 fragment ในตัวอย่างปัสสาวะ และซีรั่มจากผู้ป่วยที่เป็นมะเร็งปากมดลูก และคนปกติที่ไม่เป็นโรค ด้วยเทคนิคเวสเทิร์นบลอท และศึกษาหาปริมาณของ Endorepellin LG3 fragment ในตัวอย่างปัสสาวะจากผู้ป่วยมะเร็งปากมดลูก และคนปกติ โดยใช้ ELISA kit พบระดับการแสดงออกของโปรตีน Endorepellin LG3 fragment เพิ่มขึ้นในตัวอย่างจากผู้ป่วยมะเร็งปากมดลูก จากการศึกษาระดับการแสดงออกของยีนด้วยเทคนิค real-time PCR พบว่ามีการแสดงออกของยีน Endorepellin LG3 fragment ในเซลล์เชื้อสาย HeLa, SiHa และ CaSki ในระดับสูง เมื่อเทียบกับเซลล์เชื้อสาย C-33A จากผลการศึกษาวิจัยดังกล่าว แสดงว่าตัวบ่งชี้ทางชีวภาพดังกล่าว อาจจะนำไปใช้ประโยชน์ในการตรวจวินิจฉัยโรคมะเร็งปากมดลูกต่อไป

คำสำคัญ