การแยก การตรวจหา pluripotent markers ของเซลล์ต้นกำเนิดและการเลี้ยงเซลล์แกรนูโลซาจากของเหลวในฟอลลิเคิลของคนเพื่อประยุกต์ใช้ในงานวิจัยและการรักษาด้านชีววิทยาการเจริญพันธุ์และเวชศาสตร์ฟื้นฟูสภาวะเสื่อม
ชื่อผู้แต่งข้างต้นเป็นข้อความจากระเบียนผลงาน ไม่ได้ผูกกับรหัสนักวิจัย จึงกดดูผลงานอื่นของบุคคลนี้ไม่ได้ — ในคลังนี้ 142,080 ผลงาน (63.6% ของทั้งหมด) มีชื่อผู้แต่งที่เชื่อมกับหน้าผู้แต่งได้ และ 60,298 ผลงาน (27.0%) มีผู้แต่งที่ผูกกับรหัสนักวิจัยจริง ส่วนอีก 81,382 ผลงานไม่มีข้อมูลผู้แต่งเลย (มีชื่อผู้แต่งเป็นข้อความอยู่ 142,009 ผลงาน = 63.5%)
บทคัดย่อ
ของเหลวที่อยู่ในฟอลลิเคิล มีความสำคัญต่อ การพัฒนาของฟอลลิเคิล และการเจริญเติบโตพร้อมปฏิสนธิของไข่ ของเหลวในฟอลลิเคิล ประกอบด้วย โปรตีนและเซลล์ต่าง ๆ เช่น เซลล์แกรนูโลซา เซลล์ทีคา และเซลล์เยื่อบุบริเวณผิวด้านนอกของรังไข่ คณะผู้วิจัยได้ทำการศึกษาก่อนหน้า พบว่าเซลล์ที่แยกออกมาจากของเหลวในฟอลลิเคิล แสดงคุณลักษณะบางประการเป็นเซลล์ต้นกำเนิด ในการศึกษานี้ ทำการแยกเก็บจากของเหลวจากฟอลลิเคิล ของผู้ที่เข้ารับการรักษาภาวะมีบุตรยาก ทั้งหมด 9 คน มีจุดมุ่งหมายในการศึกษาเพื่อ ตรวจสอบการแสดงออกของโปรตีนที่บ่งชี้คุณสมบัติของการเป็นเซลล์ต้นกำเนิด เซลล์ประสาท และเซลล์เยื่อบุ ด้วยวิธีการย้อมสีทางอิมมูโนวิทยา นอกจากนั้นยังทำการเหนี่ยวนำเซลล์ที่แยกออกจากของเหลวจากฟอลลิเคิล ให้กลายเป็นเซลล์ในระบบประสาท ผลการทดลอง พบว่า เซลล์ที่แยกและเพาะเลี้ยงได้จากของเหลวของฟอลลิเคิล มีการแสดงออกของโปรตีน OCT4, NANOG, SSEA4 ซึ่งบ่งชี้ว่าเซลล์มีคุณสมบัติการเป็นเซลล์ต้นกำเนิด คล้ายคลึงกับเซลล์ต้นกำเนิดจากตัวอ่อน เซลล์มีการแสดงออกของโปรตีน Cytokeratin 8, Cytokeratin 18 ซึ่งบ่งชี้ว่าเซลล์มีคุณสมบัติของการเป็นเซลล์เยื่อบุ และตรวจพบ FSH-receptor ในเซลล์ซึ่งบ่งชี้ว่าเซลล์ที่ได้มีต้นกำเนิดมาจากฟอลลิเคิล เมื่อทำการเลี้ยงเซลล์ต่อเนื่อง พบว่าเซลล์มีการเปลี่ยนรูปร่างคล้ายกระสวย เซลล์สามารถแบ่งตัวเพิ่มจำนวนได้ ทำการตรวจสอบการแสดงออกของโปรตีนโดย flow cytometer พบว่าเซลล์มีการแสดงออกของ CD 44, CD 90, CD 73 และ CD 105 เมื่อเหนี่ยวนำให้เซลล์ที่แยกจากของเหลวจากฟอลลิเคิล เปลี่ยนแปลงไปเป็นเซลล์ที่ทำหน้าที่จำเพาะพบว่า เซลล์สามารถเปลี่ยนแปลงเป็นเซลล์กระดูกแข็ง และเซลล์กระดูกอ่อนได้ นอกจากนั้นเมื่อเหนี่ยวนำให้เซลล์เปลี่ยนแปลงเป็นเซลล์ในระบบประสาท โดยเทคนิคการเลี้ยงเซลล์แบบสามมิติ (three dimensional culture)พบว่าเซลล์สามารถเปลี่ยนรูปร่างเป็นโครงสร้างสามมิติ ที่เรียกว่า sphere และเมื่อเลี้ยง sphere บนจานเพาะเลี้ยงเซลล์ พบว่าเซลล์มีการเปลี่ยนแปลงรูปร่างคล้ายเซลล์ประสาท และมีการแสดงออกของโปรตีนที่จำเพาะต่อเซลล์ประสาท ได้แก่ Nestin, ?-tubulin III และ O4 การศึกษานี้ยืนยันได้ว่า เซลล์ที่แยกและเลี้ยงจากของเหลวจากฟอลลิเคิลมีคุณสมบัติเป็นเซลล์ต้นกำเนิด และจะมีประโยชน์ ต่อการวิจัยต่อยอดทางด้านชีววิทยาการเจริญพันธุ์ และเวชศาสตร์ฟื้นฟูสภาวะเสื่อมในอนาคต