การวิเคราะห์ทางโปรติโอมิคส์ของมะเร็งปากมดลูกในตัวอย่างปัสสาวะ

บทคัดย่อ

องค์ประกอบหลายอย่างในปัสสาวะ สามารถนำมาใช้ประโยชน์ในการตรวจวินิจฉัยทางคลินิก และรักษาโรคต่างๆ เช่น ภาวะที่ตรวจพบโปรตีนออกมาในปัสสาวะ โรคไต โรคที่เกี่ยวข้องกับ กระเพาะปัสสาวะและทางเดินปัสสาวะ โปรตีนในปัสสาวะของคนปกติมีน้อยมาก องค์ประกอบส่วน ใหญ่ในปัสสาวะ เป็นยูเรีย กรดยูริค และเกลือต่างๆ ซึ่งองค์ประกอบเหล่านี้มีผลต่อขั้นตอนการเตรียม ตัวอย่างและการแยกโปรตีนในปัสสาวะด้วยเทคนิคทางโปรติโอมิคส์ ดังนั้นการเตรียมตัวอย่างปัสสาวะ จึงเป็นขั้นตอนแรกที่สำคัญมากก่อนที่นำโปรตีนไปแยกและวิเคราะห์ โดยใช้เจลอิเลคโตรโฟรีซีสแบบ สองมิติ (Two dimensional electrophoresis) ร่วมกับเครื่องมือวิเคราะห์มวลโมเลกุลของสาร (Mass spectrometry) การศึกษาช่วงแรกได้ให้ความสำคัญต่อการเปรียบเทียบวิธีการเตรียมตัวอย่าง ปัสสาวะ เพื่อแยกโปรตีนในปัสสาวะออกมาก่อนนำไปวิเคราะห์โปรตีน ปัสสาวะของคนปกติจะถูก นำมารวมกัน และปัสสาวะของผู้ป่วยมะเร็งปากมดลูกที่นำมารวมกัน แล้วนำมาหาวิธีการเตรียม ตัวอย่างปัสสาวะเพื่อใช้ในการหาตัวบ่งชี้มะเร็งปากมดลูกจากโปรตีนในปัสสาวะ ใช้วิธีอุลตราฟิวเตร ชันและคอลัมน์เจลฟิลเตรชัน (Spin 50 mini column) กับตัวอย่างปัสสาวะเพื่อกำจัดเกลือและ องค์ประกอบอื่นที่ปนเปื้อนมา และทำให้โปรตีนเข้มข้นขึ้น ผลการวิเคราะห์แสดงให้เห็นว่าการเตรียม ตัวอย่างปัสสาวะด้วยวิธีอุลตราฟิลเตรชันและคอลัมน์ฟิลเตรชัน สามารถแยกโปรตีนในปัสสาวะ ออกมาได้มาก ซึ่งแสดงให้เห็นได้จากจำนวนจุดโปรตีนบนแผ่นเจลอิเลคโตรโฟรีซีสแบบสองมิติ การศึกษาในช่วงที่สองได้นำตัวอย่างปัสสาวะของคนปกติแต่ละคน และผู้ป่วยมะเร็งปาก มดลูกแต่ละคนมาแยกวิเคราะห์ด้วยเทคนิคเจลอิเลคโตรโฟรีซีสแบบสองมิติ และพบโปรตีนใน ปัสสาวะที่เป็นตัวบ่งชี้มะเร็งเบื้องต้น ได้แก่ Protocadherin-8, Aryl hydrocarbon receptor nuclear translocator-like protein 2, Serum albumin และ Basement membrane-specific heparan sulfate proteoglycan core protein (perlecan) นอกจากนี้การบ่งชี้โปรตีนที่พบเหล่านี้ ได้ยืนยันโดยการวิเคราะห์ด้วยเวสเทิร์นบลอท พบว่า ปริมาณของโปรตีนเหล่านี้เพิ่มขึ้นจริงในตัวอย่าง ปัสสาวะของผู้ป่วยมะเร็งปากมดลูก การเตรียมตัวอย่างปัสสาวะ รูปแบบของโปรตีน การพิสูจน์เอกลักษณ์ของโปรตีน และโปรตีน ที่มีความแตกต่าง มีความสำคัญและเป็นประโยชน์ต่อการศึกษาทางโปรติโอมิคส์ของมะเร็งปากมดลูก ในตัวอย่างปัสสาวะ จากผลของตัวบ่งชี้มะเร็งเบื้องต้นอาจกลายเป็นตัวบ่งชี้มะเร็งปากมดลูกต่อไป ซึ่ง มีความสำคัญและมีประโยชน์ต่อการวินิจฉัยโรคเบื้องต้นทางคลินิก และการประยุกต์ทางด้านยารักษา โรค นอกจากนี้ยังสามารถนำผลการวิจัยทางด้านโปรติโอมิคส์ในปัสสาวะ และผลการวิจัยจากน้ำเลือด ชิ้นเนื้อ และเซลล์เชื้อสายของผู้ป่วยโรคมะเร็งปากมดลูกในการศึกษาบทบาทหน้าที่ทางชีวภาพใน ระบบโรคมะเร็งปากมดลูกทั้งหมดต่อไป

คำสำคัญ