การวิเคราะห์สายพันธุ์ของมะไฟจีนด้วยเครื่องหมายพันธุกรรมบริเวณ intergenic spacer ในคลอโรพลาสต์ดีเอ็นเอ
ชื่อผู้แต่งข้างต้นเป็นข้อความจากระเบียนผลงาน ไม่ได้ผูกกับรหัสนักวิจัย จึงกดดูผลงานอื่นของบุคคลนี้ไม่ได้ — ในคลังนี้ 142,080 ผลงาน (63.6% ของทั้งหมด) มีชื่อผู้แต่งที่เชื่อมกับหน้าผู้แต่งได้ และ 60,298 ผลงาน (27.0%) มีผู้แต่งที่ผูกกับรหัสนักวิจัยจริง ส่วนอีก 81,382 ผลงานไม่มีข้อมูลผู้แต่งเลย (มีชื่อผู้แต่งเป็นข้อความอยู่ 142,009 ผลงาน = 63.5%)
บทคัดย่อ
ชื่อเรื่อง การวิเคราะห์สายพันธุ์ของมะไฟจีนด้วยเครื่องหมายพันธุกรรมบริเวณ intergenic spacer ในคลอโรพลาสต์ดีเอ็นเอ บทคัดย่อ มะไฟจีนเป็นพืชที่มีสรรพคุณเป็นยา มีถิ่นกำเนิดอยู่ทางตอนใต้ของจีน และถูกนำมาเพาะปลูก ในจังหวัดน่านในเขตภาคเหนือของประเทศไทย สารออกฤทธิ์ทางชีวภาพใน ใบ ราก ผล และเมล็ดของมะไฟจีนได้ถูกนำมาใช้เป็นยาพื้นบ้าน อย่างไรก็ตามข้อมูลด้านความหลากหลายทางพันธุกรรมของมะไฟจีนในจังหวัดน่านยังมีอยู่อย่างจำกัด ดังนั้นงานวิจัยนี้จึงมีวัตถุประสงค์เพื่อวิเคราะห์ความหลากหลายทางพันธุกรรมของมะไฟจีนในจังหวัดน่าน โดยใช้ตำแหน่งบริเวณ intergenic spacer จำนวน 2 บริเวณ ได้แก่บริเวณระหว่าง trnT-trnL (UniA Forward primer (5CATTACAAATGCGATGCTCT3) และUniB 5 exon Reverse primer (5TCTACCGATTTCGC CATATC3)) และ trnH-psbA (trnH primer (5CGCGCATGGTGGATTCAATCC3) และ psbA primer (5TTATGCATGAACGTAATGCTC3)) ในคลอโรพลาสต์ดีเอ็นเอเป็นเครื่องหมายทางพันธุกรรมโดยวิธีพีซีอาร์ โดยศึกษาหาอุณหภูมิที่เหมาะสมในขั้นตอน annealing ในปฏิกิริยาพีซีอาร์ และวิเคราะห์ผลิตภัณฑ์พีซีอาร์ด้วย 1.2% agarose gel electrophoresis พบว่าบริเวณ trnT-trnL intergenic spacer อุณหภูมิที่เหมาะสมสำหรับจับกับไพรเมอร์และดีเอ็นเอแม่แบบ เท่ากับ 63?C ได้ผลิตภัณฑ์พีซีอาร์ที่มีขนาด 750 คู่เบส ส่วนบริเวณ trnH-psbA intergenic spacer ได้เลือกใช้ที่อุณหภูมิ 51?C พบว่าผลิตภัณฑ์พีซีอาร์หลักมีขนาด 550 คู่เบส จากนั้นนำผลิตภัณฑ์พีซีอาร์หลักมาทำให้บริสุทธิ์โดยสกัดดีเอ็นเอออกจากเจลด้วยชุดน้ำยาสำเร็จรูป NucleoSpin? Extract II และนำไปวิเคราะห์หาลำดับของนิวคลีโอไทด์โดยวิธี Dye terminator และวิเคราะห์ความหลากหลายทางพันธุกรรมของสายพันธุ์มะไฟจีนด้วยโปรแกรม BioEdit พบว่าลำดับ นิวคลีโอไทด์ทั้งบริเวณ trnT-trnL intergenic spacer และบริเวณระหว่าง trnH-psbA intergenic spacer ของตัวอย่างของมะไฟจีนก็ไม่พบความแตกต่างและเมื่อนำไปเทียบกับฐานข้อมูล NCBI พบว่า ลำดับนิวคลีโอไทด์บริเวณ trnT-trnL intergenic spacer ของตัวอย่างมะไฟจีนมีความคล้ายคลึงกับลำดับนิวคลีโอไทด์ในคลอโรพลาสต์ของ Cirus sinensis สำหรับบริเวณ trnH-psbA intergenic spacer ของมะไฟจีนมีความใกล้เคียงกับกับลำดับนิวคลีโอไทด์ของพืชพันธุ์ Clausena anisata มากที่สุดโดยมีค่า maximum identities score เท่ากับร้อยละ 96 และ ร้อยละ 95 ตามลำดับ สรุปได้ว่าลำดับนิวคลีโอไทด์ทั้งสองบริเวณไม่สามารถใช้ในการจำแนกสายพันธุ์มะไฟจีนจังหวัดน่านได้ คำสำคัญ: มะไฟจีน; คลอโรพลาสต์ดีเอ็นเอ; Intergenic spacer