กำลังโหลดข้อมูล…
Search for a command to run...
วัตถุประสงค์ของการศึกษานี้ เพื่อผลิตตัวอ่อนโคขาวล าพูนพันธุ์แท้ที่มีลักษณะดีเยี่ยม ด้วยเทคโนโลยี Somatic cell cloning โดยใช้เซลล์ผิวหนังใบหูพระโคเป็นต้นแบบ เตรียมเซลล์ต้นแบบ (Donor cells) โดย เลี้ยงเซลล์Fibroblast จากชิ้นเนื้อใบหูโคขาวล าพูน อายุ 17 ปีเซลล์ที่ใช้เป็นเซลล์ที่เลี้ยงใน Passages 3- 10 เซลล์ไข่ผู้รับ (Recipient oocytes) ได้จากรังไข่โคที่ได้จากโรงฆ่าสัตว์ ท าการเลี้ยงเซลล์ไข่ให้เจริญถึงขั้น พร้อมปฏิสนธิในน้ ายาเลี้ยง 20 ชั่วโมงที่ 38.5?C 5% CO2 จากนั้นน าเซลล์ไข่มาก าจัดเมทาเฟส ทู ออก (enucleation) เสร็จแล้วใส่เซลล์ต้นแบบใต้เปลือกเซลล์ไข่ ท าการเชื่อมเซลล์ทั้งสอง ด้วยกระแสไฟฟ้า DC pluses 2.2 kV/cm 30 ?s ใน cell fusion medium จากนั้นเพาะเลี้ยงใน 10 ?g/ml cycloheximide และ 5 ?g/ml cytochalasin B นาน 5 ชั่วโมง เลี้ยงตัวอ่อนโคลน (reconstructed embryos) นาน 7- 8 วัน พบว่า สามารถผลิตตัวอ่อนของพระโคพันธุ์ขาวล าพูนได้ ได้ตัวอ่อนที่เจริญถึงระยะบลาสโตซีสรวม 31 ตัวอ่อน เมื่อน าตัวอ่อนไปฝากแม่โคตัวรับ พบว่าตั้งท้อง 50% (6/12) เมื่อตรวจท้องหลังฝาก 30 วัน แต่แท้งหมดเมื่อ ตรวจที่ 60 วัน ค าส าคัญ (Keywords) : Somatic Cell Cloning, Kao Lumpoon cattle, Embryo, ear fibroblast