พัฒนาชุดตรวจแยกเพศต้นอินทผลัม (Phoenix dactylifera L.) ด้วยเทคนิคแลมป์ (LAMP)
ชื่อผู้แต่งข้างต้นเป็นข้อความจากระเบียนผลงาน ไม่ได้ผูกกับรหัสนักวิจัย จึงกดดูผลงานอื่นของบุคคลนี้ไม่ได้ — ในคลังนี้ 142,080 ผลงาน (63.6% ของทั้งหมด) มีชื่อผู้แต่งที่เชื่อมกับหน้าผู้แต่งได้ และ 60,298 ผลงาน (27.0%) มีผู้แต่งที่ผูกกับรหัสนักวิจัยจริง ส่วนอีก 81,382 ผลงานไม่มีข้อมูลผู้แต่งเลย (มีชื่อผู้แต่งเป็นข้อความอยู่ 142,009 ผลงาน = 63.5%)
บทคัดย่อ
อินทผลัม (Phoenix dactylifera L.) เป็นพืชเลี้ยงเดียว ไม่สมบูรณ์เพศ ชนิดดอกแยกเพศอยู่ต่างต้น สำหรับต้นที่ปลูกจากการเพาะเมล็ดการออกดอกต้องใช้ระยะเวลา นาน 4-5 ปี จึงจะทราบเพศ การตรวจพิสูจน์เพศต้นกล้าอินทผลัมมีความจำเป็นสำหรับเกษตรกรผู้ปลูกอินทผลัมจากการเพาะเมล็ด งานวิจัยนี้ต้องการพัฒนาชุดตรวจแยกเพศต้นอินทผลัมสายพันธุ์ต่างๆ ด้วยเทคนิค LAMP โดยนำใบอินทผลัมสายพันธุ์ต่าง ๆ อาทิ KL1 บาฮีเหลือง บาฮีแดง แดงอินเดีย G2 H1 เบรม โครไนซี่ AP-red โจซี่ และอัมเอ็ดดาฮาน ทั้งที่ทราบเพศ และไม่ทราบเพศ มาสกัดดีเอ็นเอด้วย Lysis buffer ที่พัฒนาขึ้น แล้วนำดีเอ็นเอที่สกัดได้ มาเพิ่มจำนวนชิ้นส่วนดีเอ็นเอ บริเวณที่เฉพาะเจาะจงต่ออินทผลัมเพศผู้ โดยใช้ชุดไพเมอร์ จำนวน 6 เส้นที่จะถูกออกแบบมาเฉพาะสำหรับการทำเทคนิค LAMP โดยใช้เอนไซม์ BstI polymerase ในสภาวะที่เหมาะสม เป็นเวลา 60 นาที ตัวอย่างอินทผลัมที่เป็นเพศผู้ หลังจากปฏิกิริยา LAMP จะเกิดตะกอนสีขาวขุ่นไม่ละลายน้ำของ Mg2P2O7 หรือสารละลายเปลี่ยนเป็นสีชมพูหลังจากเติมสารละลาย Ethidium bromide จากผลการทดสอบความแม่นยำ พบว่าปฏิกิริยา LAMP ที่คณะผู้วิจัยได้พัฒนานี้สามารถระบุเพศได้ตรงกับตัวอย่างอินทผลัมที่ทราบเพศแล้ว นอกจากนี้คณะผู้วิจัยได้นำสารละลายที่มีส่วนประกอบของปฏิกิริยา LAMP มาผ่านกระบวนการ Freeze dried ซึ่งจะทำให้สารละลายแห้งเป็นผง สามารถเก็บได้ที่อุณหภูมิห้อง สะดวกในการใช้งานภาคสนาม เพียงเติมน้ำกลับคืนก็จะได้ชุดน้ำยาสำหรับระบุเพศต้นกล้าอินทผลัม ทั้งนี้ชุดน้ำยาสำหรับระบุเพศต้นกล้าอินทผลัมที่คณะผู้วิจัยได้พัฒนาขึ้นสามารถให้ผลการวิเคราะห์ที่รวดเร็ว ใช้งานง่าย ราคาถูก ไม่จำเป็นต้องใช้เครื่องมือที่มีราคาแพง จึงสามารถนำไปประยุกต์ใช้ตรวจระบุเพศต้นอินทผลัมในภาคสนามได้ ความสำเร็จของงานวิจัยนี้ที่สามารถประยุกต์ให้เทคนิค LAMP ในการพัฒนาชุดน้ำยาสำหรับระบุเพศต้นอินทผลัมที่มีความแม่นยำสูง ได้รับการพัฒนาขึ้นเป็นครั้งแรกโดยคณะผู้วิจัยนี้ โดยจะส่งผลให้เกษตรกรผู้ปลูกอินทผลัมจากการเพาะเมล็ดสามารถระบุเพศของต้นกล้าอินทผลัมก่อนที่จะปลูกต้นกล้าลงในแปลงปลูก ซึ่งจะสาสมารถช่วยให้เกษตรกรประหยัดเวลา และลดต้นทุนการผลิตได้