การทำให้บริสุทธิ์และศึกษาลักษณะของ multifunctional enzyme จาก Paenibacillus curdlanolyticus สายพันธุ์ B-6

บทคัดย่อ

วิธีการใหม่สำหรับการประยุกต์ใช้ผนังเซลล์ของพืชอย่างมีประสิทธิภาพคือการใช้เอนไซม์ที่มีกิจกรรมของเอนไซม์ไซลาโนไลติกและเอนไซม์เซลลูโลไลติกทั้งสองชนิดในเอนไซม์หนึ่งยีน ซึ่งทำหน้าที่ย่อยสลายโครงสร้างที่ซับซ้อนของผนังเซลล์ของพืชจากองค์ประกอบต่างๆ ได้แก่ ไซแลนซึ่งหุ้มเซลลูโลสที่เป็นโครงร้างหลัก งานวิจัยนี้เป็นการโคลนยีนที่เข้ารหัสสำหรับ acetylxylan esterase bifunctional / CMCase จาก Paenibacillus curdlanolyticus B-6 จากเอนไซม์ในน้ำเลี้ยงที่ผลิตจาก P. curdlanolyticus B-6 เมื่อใช้เปลือกข้าวโพดเป็นแหล่งคาร์บอนเพียงอย่างเดียว คัดเลือกเอนไซม์จากน้ำเลี้ยงที่แสดงกิจกรรมของไซลาเนสและคาร์บอกซิเมทิลเซลลูเลสด้วยเทคนิคไซโมแกรม โปรตีนที่มีขนาดประมาณ 75 กิโลดาลตัล แสดงกิจกรรมของเอนไซม์ทั้งสองขนิด จากนั้นวิเคราะห์ลำดับกรดอะมิโนที่ปริเวณปลายด้านเอ็น (N-terminal) เพื่อใช้โคลนยีนดังกล่าวและศึกษาลำดับกรดอะมิโน พบว่าโปรตีนนี้ประกอบด้วยโดเมนที่เป็นตัวเร่งปฏิกิริยาของ acetylxylan esterase และ CMCase ที่เชื่อมต่อกันด้วยโดเมน fibronectin type 3 2 ชนิดและครอบครัว 3 CBM ซึ่เป็นเอนไซม์หลายหน้าที่ซึ่งมีความสำคัญต่อการย่อยสลายชีวมวลในกลุ่มลิกโนเซลลูโลสในผนังเซลล์พืชอย่างมาก

คำสำคัญ