กำลังโหลดข้อมูล…
Search for a command to run...
บทคัดย่อ การศึกษานี้มีว้ตถุประสงค์เพื่อสังเคราะห์อนุภาคนาโนซิงค์ออกไซด์จากแบคทีเรียโพรไบโอติกพืชเพื่อควบคุม Xanthomonas oryzae pv. oryzae และ Pyricularia oryzae เลือก Bacillus velezensis สำหรับใช้ในการศึกษา ซึ่ง B. velezensis 11 ไอโซเลต นี้มีฤทธิ์ยับยั้ง Xoo and P. oryzae สูง และยังมีฤทธิ์ในการส่งเสริมการเจริญเติบโตของพืชจากความสามารถในการผลิต indole acetic acid และ hydrolytic enzymes ใช้ความสามารถของการผลิตสารลดแรงตึงผิวทางชีวภาพของ B. velezensis เป็นคุณสมบัติในการคัดเลือกโดยใช้ข้อบ่งชี้ได้แก่ความสามารถในการสลายเม็ดเลือดแดง ความไม่ชอบน้ำของเซลล์ กิจกรรมการเกิดอิมัลชัน และยีนที่เกี่ยวข้องกับการสร้างสาร cyclic lipopeptides ผลของการสลายเม็ดเลือดแดง การยึดเกาะของเซลล์แบคทีเรียกับเฮกซาเดเคน และการเกิดอิมัลชันของน้ำมันมะกอกยืนยันว่าแบคทีเรีย B. velezensis ทั้ง 7 สายพันธุ์สามารถผลิตสารลดแรงตึงผิวทางชีวภาพได้ นอกจากนี้ยังตรวจพบ PCR products ของยีนที่เกี่ยวข้องกับการสังเคราะห์ cLPs หกชนิดซึ่งประกอบด้วย SUR3, srfA, ituD, ituC, fenD และ bmyB ที่ควบคุมการผลิตสารลดแรงตึงผิวทางชีวภาพที่ยับยั้งจุลินทรีย์ ได้แก่ surfactin, iturin, fengycin และ bacillomycin ในการทดสอบความปลอดภัยของ B. velezensis ใช้การทดสอบความไวต่อยาปฏิชีวนะ พบว่า B. velezensis ที่ใช้ในการศึกษาไวต่อยาปฏิชีวนะที่ใช้ในการทดสอบอีกทั้ง B. velezensis ยังไม่อยู่ทะเบียนรายชื่อเชื้อก่อโรคในคนและสัตว์ พระราชบัญญัติเชื้อโรคและพิษจากสัตว์ พ.ศ. 2558 ศึกษาผลของแหล่งคาร์บอนและแหล่งไนโตรเจนต่อฤทธิ์ยับยั้ง Xoo พบว่า ฤทธิ์ยับยั้งสูงสุดและดัชนีความสามารถในการเกิดอิมัลชัน (E24) อาหารเลี้ยงเชื้อที่มีน้ำตาลกลูโคสเป็นแหล่งคาร์บอน และ แอมโมเนียมซัลเฟตเป็นแหล่งไนโตรเจน ที่นาน 72 ชั่วโมง จากนั้นหาสภาวะที่เหมาะสมสำหรับ E24 โดยใช้ Box-Behnken experiment design พบว่าสภาวะที่เหมาะสมซึ่งให้ค่า E24 สูงที่สุดคือ ปริมาณกลูโคส 10.73 กรัมต่อลิตร และแอมโมเนียมซัลเฟตเท่ากับ 6.64 กรัม/ลิตร เมื่อ pH เริ่มต้นของอาหารเท่ากับ pH 5.13 ใช้น้ำเลี้ยงเชื้อปราศจากเซลล์ของ B. velezensis LC70 และ LC130 โดยวิธีการตกตะกอนร่วม สัณฐานวิทยา และโครงสร้างของอนุภาคนาโนชีวภาพ ZnO ที่สังเคราะห์ได้ ศึกษาโดยใช้ X-ray Diffraction (XRD) สเปกโทรสโกปีแบบกระจายพลังงาน (EDS) และกล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนแบบส่องผ่าน (TEM) จากข้อมูลที่ได้ระบุว่า อนุภาคนาโน ZnO มี hexagonal phase รูปทรงกลมและรูปอื่นๆ มีเส้นผ่านศูนย์กลางอนุภาค เฉลี่ยอยู่ในช่วง 4-308 นาโนเมตร การทดลองฤทธิ์ต้านจุลินทรีย์โดยเทคนิค to spot on lawn และ agar dilution plate technique พบว่าอนุภาคนาโน ZnO มีผลยับยั้งกับแบคทีเรีย Xoo และเชื้อรา P. oryzae ศึกษาการเติมอนุภาคนาโนชีวภาพ ZnO (1,000 พีพีเอ็ม) ในดิน ที่ระยะเวลา 30 วัน ต่อจุลินทรีย์ในดินและเอนไซม์ในดิน ด้วยการวัดจำนวนจุลินทรีย์ (แบคทีเรีย ยีสต์ และรา แบคทีเรียตรึงไนโตรเจน และแบคทีเรียละลายฟอสเฟต) และกิจกรรมของเอนไซม์ (dehydrogenase, acid phosphatase, alkaline phosphatase, cellulase และ protease) ผลทดลองแสดงให้เห็นว่าการใส่อนุภาคนาโนชีวภาพ ZnO ไม่มีผลกระทบทางลบต่อประชากรจุลินทรีย์ในดิน สำหรับดินที่มีการใส่อนุภาคนาโนชีวภาพ ZnO ความเข้มข้น 1,000 ppm กิจกรรมของ dehydrogenase, alkaline phosphatase และ cellulase ถูกยับยั้ง ในขณะที่ความเข้มข้นของอนุภาคนาโนชีวภาพนี้ทำให้กิจกรรมของ acid phosphatase และกิจกรรมของ protease เพิ่มขึ้น ปลูกต้นกล้าข้าว 4 สายพันธุ์ในดินที่เติมด้วยอนุภาคนาโน ZnO และดินที่ไม่มีอนุภาคนาโน ZnO ผลการวิจัยพบว่าอนุภาคนาโน ZnO ช่วยเพิ่มความยาวของต้นการศึกษานี้แสดงในเห็นถึงวิธีการทางเลือกสำหรับการสังเคราะห์อนุภาคนาโนชีวภาพ ZnO และแสดงประสิทธิภาพในการต้านจุลินทรีย์ที่ทำให้เกิดโรคในข้าวโดยไม่มีผลเสียต่อสิ่งแวดล้อมของดินที่มีนัยสำคัญ
เป้าหมายเมื่อจบโครงการ: 4 — 4. Key elements demonstrated in laboratory environments
เมื่องานวิจัยเสร็จสิ้น คณะผู้วิจัยจะได้เทคนิค วิธีการ และต้นแบบอนุภาคนาโนชีวภาพนำไปต่อยอดการผลิตในระดับกึ่งอุตสาหกรรม เพื่อใช้ในการควบคุมจุลินทรีย์ก่อโรคข้าว
คณะผู้วิจัยมีความพร้อมทางเทคโนโลยีพื้นฐาน และห้องปฏิบัติการจุลชีววิทยาที่เพียงพอต่อการแยก ตรวจสอบชนิด และเพาะเลี้ยงเชื้อจุลินทรีย์ รวมทั้งการทดสอบฤทธิ์ทางชีวภาพ
เป้าหมายเมื่อจบโครงการ: 2 — 2. formulation of problem, proposed solution(s) and potential impact, expected societal readiness; identifying relevant stakeholders for the project.
เมื่องานวิจัยเสร็จสิ้น ได้ข้อมูลการใช้อนุภาคนาโนชีวภาพที่มีความปลอดภัย และสามารถควบคุมโรคข้าวได้ เกษตรกรมีทางเลือกในการนำไปใช้งาน ผู้บริโภคมีความมั่นใจต่อผลิตภัณฑ์มากขึ้น
ในปัจจุบันคนทั่วไปได้ให้ใส่ใจต่อสุขภาพ และให้ความสำคัญในการผลิตโภคอาหารปลอดภัย รวมทั้งผลิตภัณฑ์ทางการเกษตรที่ผลิตด้วยระบบอินทรีย์ รวมถึงข้าวอินทรีย์ด้วย