รายงานฉบับสมบูรณ์พ.ศ. 2560
การศึกษาความจำเพาะของเอนไซม์ปาเปนจากยางมะละกอ เพื่อประยุกต์ใช้ในอุตสาหกรรม
คิน เลย์ คู มหาวิทยาลัยเทคโนโลยีพระจอมเกล้าธนบุรี พ.ศ. 2560 ชื่อผู้แต่งข้างต้นเป็นข้อความจากระเบียนผลงาน ไม่ได้ผูกกับรหัสนักวิจัย จึงกดดูผลงานอื่นของบุคคลนี้ไม่ได้ — ในคลังนี้ 142,080 ผลงาน (63.6% ของทั้งหมด) มีชื่อผู้แต่งที่เชื่อมกับหน้าผู้แต่งได้ และ 60,298 ผลงาน (27.0%) มีผู้แต่งที่ผูกกับรหัสนักวิจัยจริง ส่วนอีก 81,382 ผลงานไม่มีข้อมูลผู้แต่งเลย (มีชื่อผู้แต่งเป็นข้อความอยู่ 142,009 ผลงาน = 63.5%)
บทคัดย่อ
งานวิจัยนี้มีจุดประสงค์เพื่อศึกษาบริเวณเร่งปฏิกิริยาที่ตำแหน่ง S1-subsite ของเอนไซม์ ปาเปนบริสุทธิ์ด้วยสับสเตรทสังเคราะห์ที่เป็นอนุพันธ์ของพารา-ไนโตรอะนิไลด์ โดยทำการแยกน้ำยางจากผลดิบมะละกอสายพันธุ์แขกดำ พร้อมทำการยับยั้งแอคติวิตีของเอนไซม์ด้วยสารละลาย 2,2?-dipyridyl disulphide (2PDS) อิ่มตัว เมื่อทำการแยกเอนไซม์ปาเปนให้บริสุทธิ์ด้วยเครื่อง Fast protein liquid chromatography (FPLC) โดยใช้คอลัมน์ HiLoad 26/10 SP-Sepharose HP และนำไปตรวจสอบความบริสุทธิ์และหาขนาดมวลโมเลกุลด้วยเทคนิค SDS-PAGE พบว่าปาเปนบริสุทธิ์มีขนาดมวลโมเลกุลประมาณ 29 กิโลดาลตัน จากนั้นทำการสังเคราะห์สับสเตรทที่เป็นอนุพันธ์ของพารา-ไนโตรอะนิไลด์ ได้แก่ N-Ac-L-Phe-Gly-pNA, N-Ac-L-Phe-Leu-pNA, N-Ac-L-Phe-Arg-pNA, N-Ac-L-Phe-Phe-pNA และ N-Ac-L-Phe-Glu-pNA จากการตรวจสอบความบริสุทธิ์ด้วย thin-layer chromatography, optical rotation, nuclear magnetic resonance, mass spectroscopy และ elemental analysis พบว่าสับสเตรทที่สังเคราะห์ขึ้นมีความบริสุทธิ์สูง เมื่อเปรียบเทียบความจำเพาะบริเวณ S1-subsite ของปาเปนบริสุทธิ์โดยวิธีทางจลศาสตร์ พบว่า kcat/Km ของ N-Ac-L-Phe-Gly-pNA, N-Ac-L-Phe-Leu-pNA, N-Ac-L-Phe-Arg-pNA และ N-Ac-L-Phe-Phe-pNA มีค่าเท่ากับ 269.77, 1367.00, 1469.37 และ 473.49 M-1.S-1ตามลำดับ ส่วน N-Ac-L-Phe-Glu-pNA ไม่สามารถนำมาเปรียบเทียบได้ อย่างไรก็ตามเมื่อทำการตรวจสอบแอคติวิตีกับเอนไซม์ปาเปนบริสุทธิ์ที่ความเข้มข้นอิ่มตัว พบว่ามีแอคติวิตีเท่ากับ 0.05 dA410/min แสดงให้เห็นว่าบริเวณ S1-subsite ของ active site ของเอนไซน์ปาเปนบริสุทธิ์มีคุณสมบัติค่อนข้าง broad specificity
คำสำคัญ
มะละกอการทำให้เอนไซม์บริสุทธิ์/การประยุกต์ใช้ในอุตสาหกรรม/ความจำเพาะของเอนไซม์ปาเปน/ซีสเตอีนโปรติเนส
งานวิจัยในหัวข้อใกล้เคียง
การชักนำการแสดงออกของยีน PR-1 และกิจกรรมของเอนไซม์ฟีนิลอะลานีนแอมโมเนียไลเอส การสะสมของกรดซาลิไซลิก และสคอพอลิตินในยางพาราหลังการปลูกเชื้อ
อุไรวรรณ ขุนจันทร์ มหาวิทยาลัยสงขลานครินทร์ พ.ศ. 2560 การวิจัยสมบัติทางกระแสวิทยา และสมบัติทางกลของพอลิออกซิเมทิลีนโดยการสร้างระบบร่างแหเพื่อใช้ในงานวิศวกรรม
อนุชิต คงฤทธิ์ มหาวิทยาลัยราชภัฏนครราชสีมา พ.ศ. 2560 กลไกการออกฤทธิ์ของสารสกัดลูปินิฟอลิน จากลำต้นชะเอมเหนือต่อการต้านเชื้อสแตฟฟิโลคอคคัส ออเรียส ที่ดื้อต่อยาเมทิซิลลิน
กมล อยู่สุข มหาวิทยาลัยราชภัฏเพชรบูรณ์ พ.ศ. 2560 การศึกษาโครงสร้างทางเคมีของสารออกฤทธิ์ทางชีวภาพจากมะเดื่อ
อุดมเดชา พลเยี่ยม มหาวิทยาลัยเทคโนโลยีราชมงคลพระนคร พ.ศ. 2556 การศึกษาสารเร่งปฎิกิริยาชนิด นิกเกิลเฮไลน์ และ สารอนุพันธ์
สุภกร บุญยืน มหาวิทยาลัยธรรมศาสตร์ พ.ศ. 2556 การศึกษาสมบัติทางมอดูลัสของพอลิออกซีเมทิลีนที่ผ่านการใช้งานแล้ว โดยการเติมสารควบคู่ปฏิกิริยา
สุทัศน์ ยอดเพ็ชร มหาวิทยาลัยเทคโนโลยีราชมงคลอีสาน พ.ศ. 2561 การศึกษาพัฒนาวิธีการวิเคราะห์สารเมตาโบไลต์ด้วยเทคโนโลยีไอออนโมบิลิตี้แมสสเปคโตรเมทรีเพื่อให้จำแนกสารเมตาโบไลต์ที่มีโครงสร้างซับซ้อนในผลิตภัณฑ์จากธรรมชาติ: กรณีศึกษาในพืชสมุนไพรคนทีดำ
นฤมล จริยะโสภิต สำนักงานการวิจัยแห่งชาติ (วช.) พ.ศ. 2563 การพัฒนาสารยับยั้งต่อเอนไซม์ไทโรซิเนสเพื่อใช้เป็นผลิตภัณฑ์ลดเลือนฝ้า โดยใช้เทคนิคทางเคมีเชิงคำนวณขั้นสูง การสังเคราะห์ทางเคมี และการทดลองทางชีววิทยาโมเลกุล
ภาณุพงศ์ มหาลาภบุตร สำนักงานการวิจัยแห่งชาติ (วช.) พ.ศ. 2564 กระบวนการหมักเอทานอลแบบรวมปฏิกิริยาสองขั้นตอนจากกากผลไม้เหลือทิ้งอุตสาหกรรมเกษตรโดยใช้เอนไซม์ผสมที่ได้จากการหมักแข็งในถังปฏิกรณ์ชีวภาพเดี่ยว
ผ่องศรี ศิวราศักดิ์ มหาวิทยาลัยเทคโนโลยีราชมงคลธัญบุรี พ.ศ. 2555 การใช้เอนไซม์ในการสกัดและทำบริสุทธิ์พอลิไฮดรอกซีบิวทิเรตจากเชื้อ Cupriavidus necator
กนกพร สังขรักษ์ มหาวิทยาลัยทักษิณ พ.ศ. 2556