การพัฒนาการตรวจหา เชื้อสเตรปโตคอคคัส ซูอิส และยีนที่จำเพาะต่อ ซีโรไทป์โดยใช้เทคนิค multiplex PCR
ชื่อผู้แต่งข้างต้นเป็นข้อความจากระเบียนผลงาน ไม่ได้ผูกกับรหัสนักวิจัย จึงกดดูผลงานอื่นของบุคคลนี้ไม่ได้ — ในคลังนี้ 142,080 ผลงาน (63.6% ของทั้งหมด) มีชื่อผู้แต่งที่เชื่อมกับหน้าผู้แต่งได้ และ 60,298 ผลงาน (27.0%) มีผู้แต่งที่ผูกกับรหัสนักวิจัยจริง ส่วนอีก 81,382 ผลงานไม่มีข้อมูลผู้แต่งเลย (มีชื่อผู้แต่งเป็นข้อความอยู่ 142,009 ผลงาน = 63.5%)
บทคัดย่อ
เชื้อ Streptococcus suis (S. suis) จัดเปนเช ? ื้อโรคตดติ ?อระหว?างสัตว?และคนทสี่ ําคัญ การตรวจวินิจฉัยทางห?องปฏิบัติการมีความคลาดเคลื่อนสูง หรือไม?สามารถทําได?เนื่องจากมีความ แตกต?างของคณสมบ ุ ตั ทางช ิ วเคม ี ีมาก คณะผู?วิจัยจึงได?พัฒนาวิธี multiplex PCR สําหรับการ ตรวจวินิจฉัยเชื้อ S. suis และตรวจแยกซีโรไทปโดยใช ? ไพรเมอร ? ท? ี่จําเพาะต?อ16S rRNA และ ยีน แคปซูล (capsular polysaccharide gene, cps) ซีโรไทป? 1(หรือ14), 2(หรือ1/2), 7 และ 9 และ ประเมนความถ ิ ูกต?องโดยใช?เชื้ออ?างอิงมาตรฐาน S. suis ซีโรไทป? 1/2, 1 - 9 และ 14 และเชื้อที่ ไม?ใช?S. suis จํานวน 7 ชนดิ ผลปรากฏว?า multiplex PCR ให? PCR product ตรงตามเชื้ออ?างองิ ในขณะที่เชื้ออื่นๆที่ไม?ใช?เชอื้ S. suis ใหผลลบ ? และสามารถวินิจฉัยได?ทความเข ี่ ?มข?นเชื้อตั้งแต? 104 cfu/ml ขึ้นไป เมื่อทดลองใชว?ิธี multiplex PCR ตรวจวินิจฉัยเชื้อ S. suis สายพันธทุ? ?องถิ่นที่แยก ได?จากสุกรป?วยร?วมกับวิธีทางซีรมวั ิทยา เชอื้ S. suis จากสุกรป?วยทั้งหมด 47 สายพันธุ?ซึ่งทําการ วินิจฉัยเบื้องตนด? ?วยวิธีทางจลชุ ีววิทยา และตรวจยืนยันโดยใช? API? 20 Strep ว?าเป?น S. suis 1 และS. suis 2 จํานวน 6 และ 41 สายพันธตามล ุ? ําดับ ผลการตรวจดวย? multiplex PCR ให?ผลเป?น S. suis ทุกสายพันธุ?แต?ผลการแยกซีโรไทป?ด?วยวิธี PCR มีความสอดคล?องกับ API? 20 Strep ใน ระดับต่ํา กล?าวคือเชื้อ S. suis ที่วิเคราะห?ว?าเป?น S. suis 2 โดย API? 20 Strep และผลการแยกซี โรไทปด? ?วยวิธี PCR เป?นไทป 2 ( ? หรือ 1/2) มีเพียง 34.1%(14/41) ในขณะที่ผลการแยกซีไทป?ด?วย วิธี PCR ให?ผลสอดคล?องกับวิธีทางซีรมวั ิทยาทุกตัวอย?าง คือเปนซ? ีโรไทป? 2 และ 1/2 จํานวน 7 และ 7 สายพันธุ?ตามลําดับ นอกจากนี้ยังพบซีโรไทป? 9 จํานวน 11 สายพันธุ?ซึ่งวินิจฉัยโดย API? 20 Strepว?าเป?น S. suis 1 และ S. suis 2 จํานวน 2 และ 9 สายพันธุ?ตามลําดับ สวนในส ? ุกรปกติ ทําการตรวจวินิจฉัย S. suis เป?นเบื้องต?นก?อนด?วย PCR เดี่ยวแล?วจึงใช?วิธี multiplex PCR ตรวจหาซีโรไทป?เนื่องจากตัวอย?างที่เก็บมีจํานวนถึง 1,427 ตัวอย?าง ผลการตรวจพบเชื้อ S. suis จํานวน 346 สายพันธุ?เป?นซีโรไทป 1 ( ? หรอื 14) และไทป? 2 (หรือ 1/2) จํานวน 1 และ 4 สายพันธุ? ตามลําดับ เมอตรวจย ื่ ืนยันทางซีรมวั ิทยาพบว?าเป?น ซโรไทป ี 1, 2 ? และ 1/2 จํานวน 1, 3 และ 1 สายพันธุ?ตามลําดับ วิธี multiplex PCR ที่พัฒนาขึ้นนี้สามารถให?ผลที่ถูกต?อง รวดเร็ว และ ประหยัด