การกลายพันธุ์และคัดเลือกสายพันธุ์กลายของเชื้อยีสต์ที่ผลิตเอนไซม์ไลเปส เพื่อเพิ่มประสิทธิภาพการผลิตไบโอดีเซลจากน้ำมันปาล์ม

บทคัดย่อ

บทคัดย่อ ในงานวิจัยนี้ได้ทำการแยกเชื้อและคัดเลือกเชื้อยีสต์จากตัวอย่างดินและวัสดุชนิดต่างๆในพื้นที่ของโรงงานอุสาหกรรมน้ำมันปาล์ม พบว่าเชื้อสายพันธุ์ SLP27 สามารถผลิตเอนไซม์ไลเปสได้มากที่สุด โดยให้กิจกรรมของเอนไซม์ไลเปสเท่ากับ 0.28 ยูนิต/มล. จากนั้นทำการกลายพันธุ์และคัดเลือกสายพันธุ์กลาย โดยการกลายพันธุ์ด้วยรังสีอัลตราไวโอเล็ต เป็นเวลา 38 วินาที จากนั้นทำการกลายพันธุ์ด้วยสารเอทิลมีเทนซัลฟอเนต เป็นเวลา 58 นาที และการกลายพันธุ์ด้วยรังสีแกมมา ความเข้มข้น 2 กิโลเกรย์ ได้เชื้อสายพันธุ์ UV79, EM107 และ GAM47 และให้กิจกรรมของเอนไซม์ไลเปสสูงสุดเท่ากับ 0.30, 0.36 และ 0.70 ยูนิต/มล. ตามลำดับ เมื่อทำการทดสอบการเร่งปฏิกิริยาทรานส์เอสเทอริฟิเคชันโดยใช้เอนไซม์ไลเปสจากเชื้อสายพันธุ์กลาย GAM47 เพื่อการผลิตไบโอดีเซล พบว่าสามารถเร่งปฏิกิริยาเพื่อการผลิตไบโอดีเซลได้ และผลการจำแนกชนิดเชื้อยีสต์สายพันธุ์ที่คัดเลือกในระดับสปีชีส์ด้วยวิธี D1/D2 domain of 26S ribosomal RNA sequence ซึ่งสามารถระบุชนิดของยีสต์ชนิดนี้ได้คือ Candida orthopsilosis และได้ทำการศึกษาการผลิตหัวเชื้อ Candida orthopsilosis สายพันธุ์กลายในสภาวะอาหารแข็งโดยใช้รำข้าวและกากน้ำตาล โดยศึกษาความเข้มข้นของกากน้ำตาล ปริมาณความชื้นและเวลาที่เหมาะสม เพื่อเพิ่มปริมาณเซลล์และวิเคราะห์กิจกรรมของเอนไซม์ไลเปส แล้วนำหัวเชื้อมาใช้ในการหาสภาวะของปัจจัยที่เหมาะสมในการผลิตเอทิลเอสเทอร์จากน้ำมันปาล์มดิบด้วยวิธีการวิเคราะห์พื้นผิวตอบสนอง โดยศึกษาช่วงเวลา อัตราส่วนโดยโมลของเอทานอลต่อ น้ำมันปาล์มดิบ และปริมาณหัวเชื้อ พบว่า ที่ปริมาณความชื้นร้อยละ 40 และความเข้มข้นของกากน้ำตาล ร้อยละ 10 (ปริมาตร/น้ำหนักของรำข้าว) ที่เวลา 60 ชั่วโมง มีปริมาณเซลล์ยีสต์มากที่สุดคือ 6.43 x 109 เซลล์ต่อกรัมของน้ำหนักหัวเชื้อ และสภาวะของปัจจัยที่เหมาะสมในการผลิตเอทิลเอสเทอร์ คือ ที่เวลา 72 ชั่วโมง อัตราส่วนโดยโมลของเอทานอลต่อน้ำมันปาล์มดิบ 8:1 ปริมาณหัวเชื้อร้อยละ 10 (น้ำหนัก/น้ำหนักของ น้ำมัน) และอุณหภูมิ 40๐C จะทำให้ได้ผลผลิตเอทิลเอสเทอร์สูงสุดร้อยละ 70.4 คำสำคัญ : การกลายพันธุ์ การคัดเลือก เชื้อยีสต์ ไลเปส น้ำมันปาล์ม

คำสำคัญ