การใช้เอนไซม์ในการสกัดและทำบริสุทธิ์พอลิไฮดรอกซีบิวทิเรตจากเชื้อ Cupriavidus necator
ชื่อผู้แต่งข้างต้นเป็นข้อความจากระเบียนผลงาน ไม่ได้ผูกกับรหัสนักวิจัย จึงกดดูผลงานอื่นของบุคคลนี้ไม่ได้ — ในคลังนี้ 142,080 ผลงาน (63.6% ของทั้งหมด) มีชื่อผู้แต่งที่เชื่อมกับหน้าผู้แต่งได้ และ 60,298 ผลงาน (27.0%) มีผู้แต่งที่ผูกกับรหัสนักวิจัยจริง ส่วนอีก 81,382 ผลงานไม่มีข้อมูลผู้แต่งเลย (มีชื่อผู้แต่งเป็นข้อความอยู่ 142,009 ผลงาน = 63.5%)
บทคัดย่อ
บทคัดย่อ ชื่อโครงการวิจัย การใช้เอนไซม์ในการสกัดและทำบริสุทธิ์พอลิไฮดรอกซีบิวทิเรตจากเชื้อ Cupriavidus necator ชื่อผู้วิจัย ผู้ช่วยศาสตราจารย์ ดร.กนกพร สังขรักษ์ หน่วยวิจัยชีวโมเลกุลพืช ภาควิชาเคมี คณะวิทยาศาสตร์ มหาวิทยาลัยทักษิณ อำเภอป่าพะยอม จังหวัดพัทลุง 93110 โทรศัพท์ 0 7460 9600 ต่อ 2355 ได้รับงบประมาณเงินแผ่นดิน ทุนอุดหนุนการวิจัยประเภท การวิจัยประยุกต์ ประจำปี พ.ศ. 2555 จำนวน 400,000 บาท ระยะเวลาทำการวิจัย 1 ปี ตั้งแต่วันที่ 1 กุมภาพันธ์ 2555 ถึงวันที่ 31 มกราคม 2556 งานวิจัยนี้มีวัตถุประสงค์เพื่อศึกษาศักยภาพในการใช้เอนไซม์สำหรับการสกัดและการทำบริสุทธิ์พอลิไฮดรอกซีอัลคาโนเอตที่ผลิตได้จากแบคทีเรียทั้งชนิดแกรมบวก และแกรมลบ เอนไซม์ในการทดลองเป็นเอนไซม์ที่ทำบริสุทธิ์บางส่วนและสกัดภายในห้องปฏิบัติการจากวัตถุดิบในธรรมชาติ ได้แก่โบรมีเลน เซลลูเลส ไลโซไซม และปาเปน การทดลองนี้จะใช้เปลือกสับปะรดเป็นแหล่งของเอนไซม์โบรมิเลน และเซลลูเลส ไข่ขาวและมะละกอเป็นแหล่งของไลโซไซม และปาเปน ตามลำดับ ในการทดลองแรกจะเป็นการคัดเลือกเอนไซม์ที่มีประสิทธิภาพในการสกัดและทำบริสุทธิ์ได้ดีที่สุด โดยจะคัดเลือกจากประสิทธิภาพในการทำให้ E. coli แตกตัว จากผลการทดลองพบว่าเมื่อใช้เอนไซม์ที่ความเข้มข้น 2 เปอร์เซ็นต์ (น้ำหนักต่อมวลเซลล์) เอนไซม์บรอมิเลนจะมีความสามารถในการทำให้เซลล์ E. coli แตกได้ดีที่สุด โดยมีค่า AR สูงถึง 54.7 เปอร์เซ็นต์ ดังนั้นโบรมิเลนจึงถูกคัดเลือกเพื่อใช้ศึกษาในขั้นตอนต่อไป การทดลองที่สองเป็นการศึกษาความเป็นไปได้ในการใช้เอนไซม์จากธรรมชาติในการสกัดและทำบริสุทธิ์พอลิไฮดรอกซีอัลคาโนเอตจากแบคทีเรียที่มีความสามารถในการผลิตพอลิไฮดรอกซีอัลคาโนเอต 5 สายพันธุ์ ได้แก่ Cupriavidus necator TISTR1095, Bacillus licheniformis PHAs-007, Pseudomonas sp. PHAs-045, Alcaligenes sp. PHAs-047 and Chromobacterium sp. PHAs-049 จากผลการทดลองพบว่า โบรมิเลนมีความสามารถในการสกัดพอลิไฮดรอกซีอัลคาโนเอต โดยให้ค่าเปอร์เซ็นต์ความบริสุทธิ์สูง โดยเฉพาะอย่างยิ่งการใช้เอนไซม์ในการสกัดพอลิไฮดรอกซีอัลคาโนเอตจากแบคทีเรียแกรมลบ แต่การใช้บรอมิเลนในการสกัดพอลิไฮดรอกซีอัลคาโนเอตจากแบคทีเรียแกรมบวก (B. licheniformis) ยังให้ประสิทธิภาพของการสกัดที่ต่ำอาจเนื่องมาจากโครงสร้างของแบคทีเรียแกรมบวกที่มีปริมาณเพปทิโดไกลแคนในปริมาณมากบริเวณผนังเซลล์ จากการวิเคราะห์มวลโมเลกุลของพอลิเมอร์ไม่พบการย่อยสลายที่เกิดขึ้นระหว่างกระบวนการสกัด โดยมวลโมเลกุลของพอลิไฮดรอกซีอัลคาโนเอตมีค่าคงที่ (1,370-1,350 กิโลดาลตัน) ตลอดระยะเวลาที่ใช้ในการสกัด การทดลองนี้เป็นการทดลองแรกที่แสดงให้เห็นถึงการนำเอนไซม์ที่มีความบริสุทธิ์บางส่วนมาใช้ในการสกัดและทำบริสุทธิ์พอลิไฮดรอกซีอัลคาโนเอต และยังเป็นการทดลองที่ได้ทำการทดสอบในจุลินทรีย์ทั้งชนิดแกรมบวก และแกรมลบซึ่งยังไม่เคยมีรายงานมาก่อน คำสำคัญ : กระบวนการสกัด, การทำบริสุทธิ์, พีเอชเอ, พีเอชบี, พอลิไฮดรอกซีอัลคาโนเอต, พอลิไฮ-ดรอกซีบิวทิเรต, เอนไซม์