ผลของเหงือกปลาหมอดอกขาวต่อการเกิดหลอดเลือดใหม่ และต่อการเติบโตของ เซลล์มะเร็งปากมดลูก ที่ปลูกบนผิวหนังของหนูนู๊ดไมส์

บทคัดย่อ

บทคัดย่อ มะเร็งปากมดลูกจัดเป็นมะเร็งอันดับหนึ่งที่พบในผู้หญิงไทย จากรายงานการศึกษาถึงสาเหตุ ของมะเร็งปากมดลูกจำนวนมากทั่วโลก พบว่าสาเหตุสำคัญของการเกิดมะเร็งปากมดลูก 90-99.7% เกิดจากการติดเชื้อ Human papilloma virus (HPV, Family Papillomaviridae ) ถึงแม้จะมีงานวิจัยยังไม่มากนักเกี่ยวกับผลของเหงือกปลาหมอดอกขาว (Acanthus ebracteatus Vahl, วงศ์ Acanthaceae) แต่มีการศึกษาทางเภสัชวิทยาและในตำราอายุรเวช พบว่าเหงือกปลาหมอดอกขาว มีสาร Martynoside และ Polysaccharides สามารถยับยั้งการเกิดหลอดเลือดใหม่ มีฤทธิ์ยับยั้งการสร้าง TGF-? และ MMP-9 และ human microvascular endothelial cells (HMEC-1) proliferation วัตถุประสงค์ เพื่อศึกษาผลและกลไกการออกฤทธิ์ของเหงือกปลาหมอดอกขาวต่อการเจริญของเซลล์มะเร็ง และต่อการเกิดหลอดเลือดใหม่ในโมเดลสัตว์ทดลองที่ได้รับการปลูกเซลล์มะเร็งปากมดลูก วิธีดำเนินการวิจัย นำส่วนใบและลำต้นแห้งบดของต้นเหงือกปลาหมอดอกขาว มาต้มและทำให้แห้งด้วยวิธี spray dry การศึกษาใน In vitro เพื่อทดสอบผลของเหงือกปลาหมอดอกขาว ต่อเซลล์มะเร็งปากมดลูกโดยตรง โดยใช้วิธี 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) assay เพาะเลี้ยงเซลล์ CaSki (cervical cancer cells HPV16-positive) จำนวน 104 cells/well ใน 96-well plates แล้วทำการใส่สารสกัดเหงือกปลาหมอในความเข้มข้นระหว่าง 10-1 – 104 mg/ml เป็นระยะเวลา 24, 48 และ 72 ชม จากนั้นทำการวัด % cell viability โดยวิธี MTT assay และตรวจดูโปรตีน p53 ในเซลล์มะเร็งปากมดลูกโดยวิธี Immunocytochemical study ส่วนการศึกษาใน In vivo ใช้โมเดลสัตว์ทดลอง ที่ทำการการฉีดเซลล์มะเร็งปากมดลูกเข้าสู่ชั้นผิวหนังบริเวณหลัง (Intradermal injection, 5x106) ทำการป้อนสารละลายสกัดหยาบเหงือกปลาหมอดอกขาวทุกวันในขนาด 300 และ 3,000 มิลลิกรัมต่อกิโลกรัมน้ำหนักตัว เมื่อครบกำหนด 7, 14 และ 21วันหลังการปลูกเซลล์ จึงนำมาศึกษาโดยใช้ Intravital fluorescent videomicroscopy ร่วมกับโปรแกรมวิเคราห์ภาพ (Image Software Analysis; Datatranslation Global Lab II (USA)) รวมทั้งหลังจาก เสร็จการทดลอง จึงทำการเก็บตัวอย่างเนื้อเยื่อในบริเวณที่ปลูกเซลล์มะเร็ง เพื่อนำไปตรวจหา VEGF โดยวิธี Immunohistochemistry ผลการทดลอง การศึกษาใน in vitro พบว่าที่ 48ชั่วโมง สารสกัดเหงือกปลาหมอดอกขาวมีฤทธิ์ยับยั้งการเจริญของเซลล์มะเร็ง (antiproliferation) แบบ dose-dependent (10-1-104 ?g/ml) และมีค่า IC50 คือ 5?0.89 mg/ml ส่วนการศึกษาใน in vivo พบว่าหลังการปลูกเซลล์มะเร็ง ขนาดของการขยายเพิ่มจำนวนเซลล์ในบริเวณที่ทำการปลูกและสังเกตลักษณะการพัฒนาเป็นก้อนเนื้องอกที่นูนขึ้นมาในวันที่ 21 รวมทั้งผลการวิเคราะห์หาความหนาแน่นของหลอดเลือดในบริเวณที่ปลูกเซลล์มะเร็งพบว่า วันที่ 21 สารสกัดเหงือกปลาหมอดอกขาวที่ความเข้มข้น 3,000 มิลลิกรัม ต่อกิโลกรัมน้ำหนักตัว สามารถยับยั้งการเกิดหลอดเลือดใหม่ได้อย่างมีนัยสำคัญทางสถิติ (p<0.05)

คำสำคัญ