การสังเคราะห์สารตรวจแบบเรืองแสงแบบ FRET ชนิดใหม่ (novel FRET fluorescent probe) ในการตรวจ hepatitis C virus แบบ high throughput screening

บทคัดย่อ

บทคัดย่อ ฟลูออเรสเซนต์เซนเซอร์ชนิดใหม่สำหรับตรวจสอบไอออนลบโดยอำศัยกลไกลของ fluorescence resonance energy transfer (FRET) ได้ถูกพัฒนำขึ้น โดยมีชื่อว่ำ dabsylsulforescein โดยในส่วนของโมเลกุลดังกล่ำวประกอบไปด้วย สำรเรืองแสงชนิดใหม่ที่ถูก พัฒนำขึ้นโดยทำหน้ำที่เป็นส่วนของ energy donor ทำหน้ำที่ในกำรส่งสัญญำนกำรเรืองแสงและส่วนของ dabsyl ซึ่งทำหน้ำที่เป็นส่วน ของ energy acceptor หรือหยุดกำรเรืองแสง นั้นคือ dansylsulforescein จะไม่มีกำรเรืองแสงเกิดขึ้น แต่เมื่อมีกำรเติมคลอไรด์ ไอออน ควำมสำมำรถในกำรเรืองแสงของ dabsyl sulforescein จะเกิดกำรเรืองแสงขึ้นมำอย่ำงเด่นชัดเนื่องมำจำกกำรยับยั้ง กระบวนกำร FRET นั่นเอง โครงสร้ำงของ dabsylsulforescein ได้ถูกยืนยันโดยเทคนิคทำงสเปคโตรสโกปี อำทิ IR และ NMR โดยที่ มวลโมเลกุลได้ถูกยืนยันโดยเทคนิดแมสสเปคโตรสโกปี dabsylsulforescein ที่ได้ถูกพัฒนำขึ้นจะเป็นองค์ควำมรู้สำคัญในกำรตรวจ คลอไรด์ไอออนในระดับเซลล์ต่อไป จำกองค์ควำมรู้ที่ได้จำกกำรพัฒนำคู่ FRET ขนิดใหม่ได้ถูกนำไปประยุกต์ใช้ในกำรพัฒนำ fluorescence peptidic sensor ชนิดใหม่ สำหรับในกำรตรวจสอบซีรีนโปรตีเอส (serine protease) โดยที่กำรทำงำนของ peptidic sensor อำศัยกลไกลของ FRET นี้ได้ถูก ออกแบบและสังเครำะห์ขึ้นโดยมีควำมสำมำรถในกำรตรวจสอบ chymotrypsin-like serine protease โดยที่สำยโซ่เพปไทด์ (DLEVVT) เป็นลำดับของกรดอะมิโนที่มีควำมสำคัญต่อกำรจับตัวกับ chymotrypsin-like serine protease โดยที่ปลำยทั้งสองด้ำนจะ ถูกเพิ่มกลุ่มที่เป็นคู่ FRET pair โดยที่ FRET-based peptidic sensor ที่ได้พัฒนำขึ้นมีควำมสำมำรถในกำรตรวจสอบ chymotrypsin ได้อย่ำงเฉพำะเจำะจงโดยแสดงกำรเพิ่มขึ้นของ fluorescence intensity ได้อย่ำงเด่นชัด ในขณะที่ไม่มีกำรเรืองแสงเพิ่มขึ้นเมื่อเป็น serine protease ตัวอื่นๆ อำทิ HCV-NS3/4A และ trypsin-like serine protease

คำสำคัญ