การผลิตรีคอมบิแนนท์ฮีโมไซยานินของกุ้งก้ามกรามและการทดสอบฤทธิ์ต้านไวรัสMrNV และแบคทีเรียชนิดต่างๆ

บทคัดย่อ

Hemocyanin เป็นโปรตีนเชิงซ้อนที่ประกอบด้วยหลายหน่วยย่อยพบใน hemolymp โดยเกี่ยวข้องกับระบบภูมิคุ้มกัน ในการศึกษานี้ได้แยกยีน hemocyanin ของกุ้งก้ามกรามได้สำเร็จและให้ชื่อว่า MrHC ยีน MrHC มีกรอบการอ่านที่มีความยาว 1,992 นิวคลีโอไทด์ แปลรหัสเป็นโปรตีนความยาว 663 หน่วย โดยโปรตีน MrHC มีมวลโมเลกุล 76.5 kDa ประกอบด้วยบริเวณต่างๆ ที่เป็นคุณสมบัติของ hemocyanin superfamily ประกอบด้วย hemocyanin-all-alpha domain, hemocyanin-copper containing domain และ hemocyanin-immunoglobulin-like domain จากการวิเคราะห์แผนภาพต้นไม้วิวัฒนาการของ MrHC พบว่ามีความใกล้ชิดกับ hemocyanin ของ Palaemon carinicauda และ Macrobrachium nipponense ยีน MrHC มีการแสดงออกในเนื้อเยื่อหลายชนิดของกุ้งได้แก่ ตับและตับอ่อน เหงือก เม็ดเลือด กระเพาะ และกล้ามเนื้อ จากการศึกษาการแสดงออกของยีน MrHC หลังจากฉีดเชื้อไวรัส Macrobrachium rosenbergii nodavirus (MrNV) พบว่ายีน MrHC มีระดับการแสดงออกเพิ่มขึ้น 237 เท่าในวันที่ 2 นอกจากนี้ผลการทดสอบคุณสมบัติการต้านจุลชีพของรีคอมบิแนนท์โปรตีน MrHC บริเวณ immunoglobulin-like domain พบว่ามีฤทธิ์ยับยั้งการเจริญของเชื้อแบคทีเรีย Vibrio vulnificus, V. parahemolyticus, A. caviae, A. verronii, A. hydrophila, และ Bacillus cereus จากผลงานวิจัยนี้แสดงให้เห็นว่า MrHC มีความเกี่ยวข้องกับการป้องกันเชื้อโรคในระบบภูมิคุ้มกันที่มีมาแต่กำเนิด โดยเฉพาะอย่างยิ่งต่อเชื้อแบคทีเรียและไวรัส MrNV

คำสำคัญ