การศึกษาเทคนิคกระตุ้นให้เกิดกฤษณาในเนื้อไม้กฤษณาโดยใช้ฮอร์โมนพืช

บทคัดย่อ

การวิจัยในครั้งนี้ มีวัตถุประสงค์เพื่อศึกษาอิทธิพลของฮอร์โมนพืชต่อการเกิดกฤษณา (agarwood) ในเนื้อไม้ของต้นกฤษณา (Aquilaria crassna) โดยทำการทดลองสร้างบาดแผล (wound) ด้วยการเจาะรูร่วมกับการใส่ฮอร์โมนพืชได้แก่ Ethrel (E), Methyl jasmonate (M) และ Ethrel + Methyl jasmonate (EM) ลงไปในรูเจาะ และใช้น้ำกลั่น (distilled water) เป็นตัวแทนของทรีทเมนต์ควบคุม (Control) ต้นกฤษณาจะถูกสุ่มตัดเก็บทุก ๆ 2 ชม. 4 ชม. 6 ชม. 8 ซม. 10 ซม. 12 ซม. 14 ซม. 16 ซม. 18 ซม. และ 20 ซม. ภายหลังจากทำการเจาะและใส่สารกระตุ้นแต่ละชนิดลงไปแล้ว จากนั้นทำการวิเคราะห์เพื่อหาปริมาณโปรตีนที่แสดงออกภายหลังการกระตุ้นด้วยฮอร์โมนพืชชนิดต่าง ๆ ด้วยวิธี SDS-PAGE และวิเคราะห์ชนิดของโปรตีนที่แสดงออกด้วยวิธี LC/MS-MSผลการศึกษาพบว่า ต้นกฤษณาที่ถูกกระตุ้นให้เกิดกฤษณา (agarwood) ในเนื้อไม้โดยใช้ Ethrel ภายหลังการกระตุ้นผ่านไป 4 ชั่วโมง (E4), Methyl jasmonate ภายหลังการกระตุ้นผ่านไป 6 ชั่วโมง (M6) และ Ethrel + Methyl jasmonate ภายหลังการกระตุ้นผ่านไป 6 ชั่วโมง (EM6) มีปริมาณและจำนวนแถบโปรตีนแตกต่างจากทรีทเมนต์ Control (C8) อย่างเห็นได้ชัด โดยพิจารณาจากแถบของโปรตีนที่แสดงออกมีขนาดใหญ่และมีสีเข้มหนากว่าโปรตีนที่ถูกกระตุ้นด้วยทรีทเมนต์ Control (C8) เมื่อตัดแถบของโปรตีนเหล่านั้นไปวิเคราะห์ชนิดของโปรตีนพบว่า โปรตีนจาก E4 มีความใกล้เคียงกับโปรตีนในพืชเมื่อเปรียบเทียบกับ protein sequence ที่มีรายงานไว้แล้วใน Genbank อาทิเช่น hypothetical protein F383_17393, accession no. gi|728808270 ซึ่งพบใน Gossypium arboretum และ Rps16, partial (chloroplast), accession no. gi|240252627 ใน Lithospermum obovatum และ chalcone synthase, accession no. gi|76008546 ใน Hippophae rhamnoides โดยเฉพาะโปรตีนจาก M6 มีการแสดงออกของโปรตีนที่มีความใกล้เคียงกับโปรตีนของไม้ยืนต้นต้นชนิดต่าง ๆ ที่มีรายงานไว้ใน Genbank โดยโปรตีนชนิด PHD finger family protein, partial, accession no. gi|566168909 ซึ่งพบในไม้ Populus trichocarpa นอกจากนี้ยังพบโปรตีน hypothetical protein EUGRSUZ_F013301, partial, accession no. gi|629102106 ในไม้ Eucalyptus grandis โปรตีนชนิด putative amylogenin, accession no. gi|81025270 ในไม้ Pinus armandii และโปรตีนชนิด R2R3 MYB transcription factor, partial, accession no. gi|582054408 ในไม้ Ginkgo bilobaสำหรับปริมาณการเกิดกฤษณา (agarwood) ในเนื้อไม้กฤษณาจากลำต้นกฤษณาเมื่อวัดปริมาณการสะสมกฤษณาโดยพิจารณาจากสีของเนื้อไม้ที่เปลี่ยนไปเนื่องจากมีการสะสมของ secondary metabolites ผลการศึกษาพบว่า ปริมาณการเปลี่ยนแปลงของสีในเนื้อไม้ของต้นกฤษณาที่ถูกกระตุ้นด้วยการทำบาดแผลร่วมกับการใส่ Methyl jasmonate มีค่าสูงทั้งทางด้านความกว้าง (width) และทางด้านความยาว การเปลี่ยนแปลงของสีในเนื้อไม้ในวิธีการกระตุ้นโดยการทำบาดแผลร่วมกับการใส่ Ethrel พบว่า การเปลี่ยนแปลงทางด้านความกว้าง (width) มีค่าใกล้เคียงกับการเปลี่ยนแปลงในวิธีการกระตุ้นโดยทรีทเมนต์ Control แต่การเปลี่ยนแปลงของสีทางด้าน (length) กลับมีค่าสูงที่สุดเมื่อเปรียบเทียบกับทุกวิธีการกระตุ้น

คำสำคัญ