ไบโอเซนเซอร์ระดับเซลล์แบบสามมิติ เพื่อการค้นหายายับยั้งไทโรซีนไคเนสของ อีจีเอฟอาร์

บทคัดย่อ

การแสดงออก การเพิ่มจำนวนและการกลายพันธ์ของอิพิเดอร์มอล์ โกรทเฟคเตอ์ รีเซปเตอร์ (EGFR) นั้นเกี่ยวข้องกับมะเร็งหลายชนิดและเป็นเป้าหมายสำคัญในการค้นหายายับยั้งมะเร็ง การยับยั้งกิจกรรมของอีจีเอฟอาร์โดยโมโนโคนอลแอนติบอดี และโมเลกุลขนาดเล็กได้แสดงให้เห็นถึงประสิทธิภาพในการรักษามะเร็ง แอนตีบอดีนั้นจับภายนอกเซลล์ในขณะที่โมเลกุลขนาดเล็กจับกับกรดอะมิโนไม่กี่ตัวและก่อให้เกิดการกลายพันธุ์ที่ดื้อยาได้อย่างรวดเร็วหลังการรักษา ดังนั้นการค้นหายายับยั้งอีจีเอฟอาร์ตัวใหม่ที่มีประสิทธิภาพจึงมีความจำเป็น อย่างไรก็ตามโมเดลในการค้นหายาปัจจุบันมักใช้เซลล์แบบ 2D ซึ่งหลายครั้งไม่สามารถจำลองสภาวะที่ใกล้เคียงในสัตว์ทดลองได้ ซึ่งอาจเกิดจาก เซลล์แบบ 2D นั้นไม่มีการปฏิสัมพันธ์กันระหว่างเซลล์กับเซลล์ และเซลล์กับเมทริกซ์ ซึ่งจำลองสภาวะแวดล้อมเล็กๆ รอบๆ มะเร็ง เซลล์สเฟียรอยด์แบบ 3D สามารถจำลองสิ่งแวดล้อมเล็กๆ รอบๆมะเร็ง และความซับซ้อนในเซลล์ เช่น โพลาไลเซชั่นของเซลล์ การกลายสภาพของเซลล์ สภาวะpH ที่แตกต่างออกไป และ การหลังไซโตไคน์ ดังนั้น ผู้วิจัยจึงต้องการจัดทำ ไบโอเซนเซอร์ระดับเซลล์แบบ 3D เพื่อใช้ในการค้นหาสารยับยั้ง อีจีเอฟอาร์ โดยใช้ตัวรายการการทำงานของอีจีเอฟอาร์ด้วย หลักการ Fluorescence Resonance Energy Transfer (FRET) ตัวรายงานการทำงานของอีจีเอฟอาร์ จะสร้างสารตั้งตั้งของอีจีเอฟอาร์ในเซลล์จากการแปลรหัสดีเอ็นเอ พร้อมกับฟลูโอเรสเซนโปรตีนสองตัว ซึ่งคู่ของฟลูโอเรสเซนโปรตีนนี้จะประกอบด้วยคู่ของ Cyan fluorescent protein (CFP)/yellow fluorescent protein (YFP), green fluorescent protein (GFP)/red fluorescent protein (RFP), and orange fluorescent protein (OFP)/maroon fluorescent protein (MFP เพื่อทดสอบถึงคู่ที่ให้สัญญาณที่ตอบสนองไวที่สุดในเซลล์ระดับ 2D และ 3D ในการทดลองนี้ ผู้วิจัยจะใช้เซลล์มะเร็งปอดชนิด เซลล์ไม่ใหญ่ (non-small cell lung cancer, NSCLC ) เป็นตัวแทนของเซล์มะเร็ง เพื่อทดสอบโมเดล ไบโอเซนเซอร์ระดับเซลล์แบบ 3D หลังจากนั้นระบบ ไบโอเซนเซอร์ระดับเซลล์แบบ 3D จะใช้ในการคัดสรรสารสังเคราะห์จำนวนมากจากฐานข้อมูลสารยับยั้งการทำงานของอีจีเอฟอาร์ต่อไป

คำสำคัญ