การปรับปรุงสายพันธุ์ Escherichia coli เพื่อผลิตกรดแลกติกด้วยเทคนิค ทางพันธุศาสตร์โมเลกุล
ชื่อผู้แต่งข้างต้นเป็นข้อความจากระเบียนผลงาน ไม่ได้ผูกกับรหัสนักวิจัย จึงกดดูผลงานอื่นของบุคคลนี้ไม่ได้ — ในคลังนี้ 142,080 ผลงาน (63.6% ของทั้งหมด) มีชื่อผู้แต่งที่เชื่อมกับหน้าผู้แต่งได้ และ 60,298 ผลงาน (27.0%) มีผู้แต่งที่ผูกกับรหัสนักวิจัยจริง ส่วนอีก 81,382 ผลงานไม่มีข้อมูลผู้แต่งเลย (มีชื่อผู้แต่งเป็นข้อความอยู่ 142,009 ผลงาน = 63.5%)
บทคัดย่อ
ปัจจุบันมีการศึกษาเพื่อค้นหาสารต้านอนุมูลอิระจากแหล่งธรรมชาติกันอย่างมากมาย เปปไทด์จากพืชก็เป็นหนึ่งในนั้น งานวิจัยนี้ได้คัดเลือกเปปไทด์ที่มีฤทธิ์ในการต้านอนุมูลอิสระจากกากเมล็ดแมงลักหลังจากสกัดน้ำมัน โดยตั้งชื่อว่า OSW (QTFQYSRGWTN) ทั้งนี้การสกัดจากธรรมชาติโดยตรงยังพบปัญหา เช่น การควบคุมส่วนผสมของเปปไทด์ในโปรตีนไฮโดรไลเสต งานวิจัยนี้จึงเลือกเทคนิคด้านพันธุศาสตร์โมเลกุลมาใช้แก้ปัญหาเหล่านี้ เนื่องจากเปปไทด์มีขนาดเล็กมาก จึงออกแบบชิ้นส่วนดีเอ็นเอให้ประกอบด้วยออกแบบนิวคลีโอไทด์ที่แปลรหัสแล้วได้เป็นลำดับกรดอะมิโอของเปปไทด์ OSW เรียงต่อกัน 7 ชุด แต่ละชุดคั่นด้วยโคดอนแอสปาติก เพื่อให้ชิ้นส่วนดีเอ็นเอยาวเพียงพอสำหรับการจัดการด้วยเทคนิคด้านพันธุศาสตร์โมเลกุล ในการทดลองนี้เลือกใช้ระบบ Escherichia coli และ Pichia pastoris ในการผลิตรีคอมบิแนนท์เปปไทด์ OSW สำหรับระบบ E. coli พบว่าสามารถผลิตรีคอมบิแนนท์เปปไทด์ OSW ได้ แต่ยังมีปริมาณน้อยเมื่อเทียบกับงานวิจัยอื่นและปัญหาในการทำให้บริสุทธิ์โดยปริมาณโปรตีนที่ได้มีมากพอ อย่างไรก็ตาม เมื่อใช้ระบบ P. pasotoris พบว่ายังไม่ประสบความสำเร็จในการรีคอมบิแนนท์เปปไทด์เป้าหมาย เมื่อนำรีคอมบิแนนท์เปปไทด์ OSW ที่ผลิตจากระบบ E. coli มาทดสอบความสามารถในการกำจัดอนุมูลอิสระพบว่า รีคอมบิแนนท์เปปไทด์กำจัดอนุมูล DPPH และ ABTS ได้น้อย แต่ยังมากกว่าเปปไทด์ที่สังเคราะห์ทางเคมีอย่างมีนัยยะสำคัญ ทั้งนี้ รีคอมบิแนนท์เปปไทด์ OSW มีความสามารถในการปกป้องดีเอ็นเอจากอนุมูลไฮดรอกซิลได้ดีกว่าเปปไทด์ที่สังเคราะห์ทางเคมีประมาณ 100 เท่า และมีความสามารถในการยับยั้งการผลิตไนตริกออกไซด์จากเซลล์แมคโครฟาจ RAW 264.7 ที่ถูกกระตุ้นด้วย LPS ได้ที่ความเข้มข้นต่ำๆได้ดี โดยมีค่า IC50 ที่ 6.88 ?g/mL ส่วนเปปไทด์ OSW ที่สังเคราะห์ทางเคมี ไม่พบการยับยั้งการผลิตไนตริกออกไซด์ คำสำคัญ: อนุมูลอิสระ, สารต้านอนุมูลอิระ, รีคอมบิแนนท์เปปไทด์, แมงลัก, Escherichia coli, Pichia pastoris